Question

8．白細(xì)胞介素是一類(lèi)淋巴因子．研究人員將人白細(xì)胞介素的基因?qū)�入到酵母菌�?xì)胞中，使其分泌出有活性的白細(xì)胞介素．

（1）為增加白細(xì)胞介素基因的數(shù)量，可使用PCR技術(shù)，但前提是必須知道該基因的部分核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成設(shè)計(jì)引物．
（2）為便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有外源基因，攜帶外源基因的質(zhì)粒上應(yīng)有標(biāo)記基因，還應(yīng)有啟動(dòng)子和終止子，以利于外源基因的表達(dá)．
（3）在重組載體導(dǎo)入酵母菌細(xì)胞之前，需用Ca²⁺處理酵母菌細(xì)胞，白細(xì)胞介素基因進(jìn)入酵母菌細(xì)胞內(nèi)，并且在其細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化．在表達(dá)過(guò)程中，啟動(dòng)子需與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程．
（4）為了能成功表達(dá)出白細(xì)胞介素，不使用細(xì)菌，而使用酵母菌細(xì)胞作為受體細(xì)胞，可能原因是細(xì)菌細(xì)胞中無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細(xì)胞介素的細(xì)胞器．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點(diǎn)，所以切割載體和目的基因時(shí)用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體．基因表達(dá)載體含有目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等成分．

解答 解：：（1）基因工程中，擴(kuò)增目的基因的方法為PCR技術(shù)，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設(shè)計(jì)引物．
（2）基因表達(dá)載體含有目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等成分，標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因．啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)．終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端．因此啟動(dòng)子和終止子可利于外源基因的表達(dá)．
（3）在重組載體導(dǎo)入酵母菌細(xì)胞之前，需用Ca²⁺處理酵母菌，使酵母菌稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞，白細(xì)胞介素基因進(jìn)入酵母菌細(xì)胞內(nèi)，并且在其細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化．在表達(dá)過(guò)程中，啟動(dòng)子需與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程．
（4）在體液免疫過(guò)程中，白細(xì)胞介素是由T淋巴細(xì)胞分泌的．由于細(xì)菌屬于原核生物，細(xì)胞中無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細(xì)胞介素的細(xì)胞器，因此為了能成功表達(dá)出白細(xì)胞介素，不使用細(xì)菌，而使用酵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞．
故答案為：
（1）PCR     設(shè)計(jì)引物
（2）標(biāo)記基因      啟動(dòng)子和終止子
（3）Ca2+轉(zhuǎn)化      RNA聚合酶
（4）細(xì)菌細(xì)胞中無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細(xì)胞介素的細(xì)胞器

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，綜合考查免疫、基因工程、PCR技術(shù)等知識(shí)，要求考生識(shí)記人體免疫細(xì)胞的組成及特異性免疫過(guò)程；識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)答題．