Question

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KlFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖．

（1）過(guò)程①構(gòu)建的重組表達(dá)載體除具有KlFⅡ基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等．其中標(biāo)記基因的作用是

 

．
（2）在過(guò)程②中，用

 

處理能將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞．在培養(yǎng)過(guò)程中，需將成纖維細(xì)胞置于pH值約為

 

培養(yǎng)液中，并且放在含95%的空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（3）在過(guò)程③中，卵母細(xì)胞除可從活體輸卵管中采集外．還可以從已宰殺的母羊

 

中獲取；成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理，同時(shí)用微型吸管吸走

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因，其中標(biāo)記基因是用來(lái)鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)的．
卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：
主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．
第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞；
第三種方法：是直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，叫活體采卵．采集的卵母細(xì)胞，都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精．

解答： 解：（1）重組表達(dá)載體應(yīng)包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因是用來(lái)鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)的．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程可用胰蛋自酶或膠原蛋自酶處理，培養(yǎng)條件為PH大約 7.2-7.4、5%的CO₂的混合空氣．
（3）卵母細(xì)胞可從活體輸卵管、已宰殺的母羊卵巢中采集；成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理的同時(shí)用微型吸管吸走第一極體，防止干擾．
故答案為：
（1）鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶  7.2-7.4
（3）卵巢   第一極體

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因表達(dá)載體的組成以及各結(jié)構(gòu)的功能；識(shí)記卵母細(xì)胞采集的方法；明確動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中胰蛋白酶或膠原蛋白酶的使用．