Question

13．酵母菌在缺氧、pH為．4.5-6.0的條件下生長繁殖，而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制．某同學用果園土為實驗材料，從土壤中分離純化酵母菌．實驗步驟如下：
①土壤取樣、制備樣品液；
②配制培養(yǎng)基并滅菌、制作平板若干；
培養(yǎng)基A：PH為5.0的乳酸馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
培養(yǎng)基B：PH為5.0的乳酸馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液
③用無菌吸管取樣品液1ml，注入到有30ml培養(yǎng)基B的錐形瓶中，在30℃、無氧環(huán)境中培養(yǎng)24h；
④24h后，用另一支無菌吸管從錐形瓶中取培養(yǎng)液0．lml，分別接種到若干培養(yǎng)基A的平板上，倒置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)48小時；
⑤鏡檢、菌種保藏．
請回答下列問題：
（1）根據(jù)實驗結(jié)果，判斷酵母菌的呼吸方式為兼性厭氧型．
（2）第②步配制的培養(yǎng)基，常采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）第③步實驗操作是否具有選擇作用，有，說明理由無氧、乳酸的酸性條件可以抑制其它微生物的生長，而酵母菌生長繁殖．
（4）第④步的接種方法稀釋涂布平板（或涂布平板）．
（5）某同學欲測定樣品液中酵母茁數(shù)量，采用顯微鏡直接計數(shù)方便快捷并且儀器損耗較�。�這樣得出的結(jié)果往往比實際值偏高（填“偏高”、“基本不變”“偏低”），理由是計算時也包括了酵母菌死細胞（以及微小雜物）．

Answer 1

分析 1、酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～25℃，其代謝類型屬于兼性厭氧型，在有氧的條件下能夠有氧呼吸大量繁殖，無氧條件下無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳．
2、兩種純化細菌的方法的比較

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

解答 解：（1）根據(jù)實驗步驟可知，步驟③中“無氧環(huán)境中培養(yǎng)24h”，說明酵母菌能夠進行無氧呼吸，而步驟④中“倒置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)48小時”，說明酵母菌能夠進行有氧呼吸．
（2）培養(yǎng)基常采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）第③步中無氧、乳酸的酸性條件可以抑制其它微生物的生長，而酵母菌生長繁殖，因此該實驗操作具有選擇作用．
（4）根據(jù)實驗操作步驟可知，第④步的接種方法．
（5）采用顯微鏡直接計數(shù)時，將活的酵母菌和死的酵母菌全部計數(shù)在內(nèi)，因此該方法得出的結(jié)果往往比實際值偏高．
故答案為：
（1）兼性厭氧型
（2）高壓蒸汽滅菌
（3）有
無氧、乳酸的酸性條件可以抑制其它微生物的生長，而酵母菌生長繁殖
（4）稀釋涂布平板（或涂布平板）
（5）偏高       計算時也包括了酵母菌死細胞（以及微小雜物）

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生掌握選擇培養(yǎng)基的特點，識記分離和純化微生物常用的兩種方法，掌握采用稀釋涂布平板法計數(shù)微生物的具體過程，能結(jié)合所學的知識準確答題．