Question

15．（1）在植物基因工程中，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，通常要用（同種）限制酶分別切割含目的基因的DNA分子和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶  進(jìn)行連接．
（2）PCR反應(yīng)過程中溫度較高，為保證反應(yīng)的進(jìn)行，需要一種耐高溫的TaqDNA聚合酶．該酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，若要與其相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分離，一般采取凝膠色譜法，它是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)．
（3）動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時，要保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，在營養(yǎng)方面最終需在培養(yǎng)基中加入血清（或血漿） 等天然成分．細(xì)胞培養(yǎng)需在適宜的理化條件下進(jìn)行，此外還需要一定的氣體環(huán)境，其中C0₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH．

Answer 1

分析 DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）適宜的溫度和PH
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（CO₂能夠維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）在植物基因工程中，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，通常要用（同種）限制酶分別切割含目的基因的DNA分子和 Ti質(zhì)粒，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶進(jìn)行連接．
（2）蛋白質(zhì)的分離實驗中，若要與其相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分離，一般采取凝膠色譜法，它是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)．
（3）動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時，要保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，在營養(yǎng)方面通常需要在培養(yǎng)基中加入 血清（或血漿）等天然成分．細(xì)胞培養(yǎng)需在適宜的理化條件下進(jìn)行，此外還需要一定的氣體環(huán)境，其中C0₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
故答案為：
（1）（同種）限制酶   含目的基因的DNA分子  DNA連接酶
（2）凝膠色譜法    相對分子質(zhì)量
（3）無菌、無毒     血清（或血漿）    維持培養(yǎng)液的PH

點評 本題考查了基因工程和細(xì)胞工程等有關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的工具酶及應(yīng)用；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)條件以及培養(yǎng)基的成分等；掌握蛋白質(zhì)提取和分離的原理和方法，屬于簡單題．