Question

Ⅰ．為提高某作物的耐鹽性，采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將耐鹽基因R導(dǎo)入受體細(xì)胞，經(jīng)篩選和培養(yǎng)獲得若干單拷貝（體細(xì)胞中只有1個(gè)耐鹽基因）轉(zhuǎn)基因耐鹽植株，其中3株能在中鹽濃度條件下開花結(jié)實(shí)．若對(duì)其中1株（甲）自交后代進(jìn)行耐鹽性檢測(cè)，結(jié)果為耐高鹽25株、耐中鹽49株、不耐鹽26株．請(qǐng)回答：
（1）農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因過程中，目的基因與質(zhì)粒經(jīng)相應(yīng)的

 

切割，再用DNA連接酶連接，形成

 

．通常根據(jù)質(zhì)粒中設(shè)計(jì)的抗生素

 

，在培養(yǎng)基中添加該種抗生素篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，再進(jìn)行目的基因等的鑒定．
（2）甲自交后代中耐鹽性狀的分離比與單基因

 

（填“顯性”或“不完全顯性”或“完全顯性”）遺傳的性狀分離比相同．由此推測(cè)轉(zhuǎn)基因植株的耐鹽性狀是由核基因控制的，耐鹽基因已整合到細(xì)胞核中的

 

上．
（3）若用R+表示有耐鹽基因，R-表示無(wú)耐鹽基因，則甲植株的基因型可表示為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植,胚胎分割移植

專題：

分析：1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、基因分離定律的實(shí)質(zhì)：在雜合子的細(xì)胞中，位于一對(duì)同源染色體上的等位基因，具有一定的獨(dú)立性；生物體在進(jìn)行減數(shù)分裂形成配子時(shí)，等位基因會(huì)隨著同源染色體的分開而分離，分別進(jìn)入到兩個(gè)配子中，獨(dú)立地隨配子遺傳給后代．

解答： 解：（1）基因工程中，常用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，以產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒．通常根據(jù)質(zhì)粒中的標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）來(lái)篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，再進(jìn)行目的基因等的鑒定．
（2）甲自交后代中，耐高鹽：耐中鹽：不耐鹽=1：2：1，與單基因不完全顯性遺傳性狀的分離比完全相同（即AA：Aa：aa=1：2：1），這說明耐鹽基因已整合到細(xì)胞核中的染色體上，因此遵循基因的分離定律．
（3）根據(jù)題甲自交后代的性狀分離比可推測(cè)出甲相當(dāng)于雜合子，即其的基因型為R⁺R^-．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）　重組質(zhì)粒　抗性基因
（2）不完全顯性   　染色體
（3）R+R-

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、基因分離定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟；掌握基因分離定律的實(shí)質(zhì)，能根據(jù)題干中分離比進(jìn)行準(zhǔn)確推斷，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．