Question

【題目】下圖是從酵母菌中獲取某植物需要的控制某種酶合成的基因的流程，結(jié)合所學知識及相關(guān)信息回答下列問題：

（1）圖中cDNA文庫 _______（填“大于”“小于”或“等于”）基因組文庫。

（2）①過程提取的DNA需要 ____________的切割，B過程是_________________。

（3）為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因，可用 ____________擴增的方法，其原理是 _____________________

（4）目的基因獲取之后，需要進行 ___________________，其組成必須有 ______________________以及標記基因等，此步驟是基因工程的核心。

（5）將該目的基因?qū)�入某雙子葉植物細胞，常采用的方法是_____________，其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是 _________________________，可以用 ____________________技術(shù)進行檢測。

（6）如果要想使該酶活性更強或具有更強的耐受性，需要對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，這要通過蛋白質(zhì)工程。首先要預期蛋白質(zhì)功能，設(shè)計預期的 __________，再推測應有的氨基酸序列，找到相對應的 ____________。

Answer 1

【答案】（1）小于 （2）限制酶 逆轉(zhuǎn)錄 （3）PCR技術(shù) DNA復制

（4）基因表達載體的構(gòu)建 啟動子、終止子、目的基因（復制原點可不答）

（5）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 目的基因是否整合到植物細胞的染色體上 DNA分子雜交

（6）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 脫氧核苷酸序列

【解析】分析圖形可知，圖中①過程是從供體細胞內(nèi)提取目的基因構(gòu)建基因組文庫的過程，A過程是篩選含目的基因的菌株，B過程是以mRNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建cDNA文庫的過程，C過程是篩選含目的基因的菌株。

（1）cDNA文庫只含有某生物的部分基因，基因組文庫含有該生物的全部基因，故cDNA文庫小于基因組文庫。

（2）①過程提取的DNA需要限制酶切割，B過程是以mRNA為模板通過反（逆）轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建cDNA文庫的過程。

（3）為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因，可用PCR技術(shù)擴增的方法，其原理是DNA復制。

（4）目的基因獲取之后，需要進行基因表達載體的構(gòu)建，其組成必須有啟動子、終止子、復制原點、目的基因以及標記基因等，此步驟是基因工程的核心。

（5）將該目的基因?qū)�入某雙子葉植物細胞，常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否整合到植物細胞的染色體上，可以用DNA分子雜交技術(shù)進行檢測。

（6）如果要想使該酶活性更強或具有更強的耐受性，需要對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，首先要預期蛋白質(zhì)功能，設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列。