Question

克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)．Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系．克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖．
請(qǐng)回答：
（1）圖中①過(guò)程采用的技術(shù)手段稱做

 

技術(shù)．
（2）②過(guò)程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有

 

．
（3）在PCR過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA中Bcl-2cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平．
①圖中X表示

 

過(guò)程．
②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成2種

 

用于PCR擴(kuò)增，除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及

 

．
③PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是

 

．
（4）克隆豬的成功培育說(shuō)明

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù),PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：分析題圖：圖示為克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程圖，圖中①表示動(dòng)物體細(xì)胞核移植過(guò)程，即將良種豬體細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中形成重組細(xì)胞；②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程；X表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA的過(guò)程．

解答： 解：（1）圖中①過(guò)程采用的技術(shù)手段是體細(xì)胞核移植，即把良種豬的體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，構(gòu)建一個(gè)新的重組細(xì)胞．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液不同植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，主要區(qū)別是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入動(dòng)物血清等天然成分．
（3）①由以上分析可知X表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程．
②PCR擴(kuò)增技術(shù)是在高溫條件下進(jìn)行的，需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
③擴(kuò)增第一輪循環(huán)的模板是Bcl-2cDNA．
（4）克隆豬的成功培育說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性．
故答案為：
（1）體細(xì)胞核移植 
（2）動(dòng)物（豬）血清  
（3）①逆轉(zhuǎn)錄  ②引物     TaqDNA聚合酶 （耐高溫DNA聚合酶）  ③Bcl-2cDNA    
（4）高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合克隆豬的培育過(guò)程圖，考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、PCR擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用，要求考生識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植的概念、原理及過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱；識(shí)記PCR技術(shù)的條件，能結(jié)合題干信息答題．