Question

【題目】北方寒冷地區(qū)為了延長大豆的生長時(shí)間來提高產(chǎn)量，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種抗凍蛋白基因成功導(dǎo)入大豆細(xì)胞，得到了轉(zhuǎn)基因植株�；卮鹣铝袉栴}：

（1）用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用大豆____________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是___________________。

（2）植物基因工程常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是因?yàn)檗r(nóng)桿菌細(xì)胞中的Ti質(zhì)粒上有一段特殊序列稱為_____________，其特點(diǎn)是_________________________________________。

（3）若要檢測轉(zhuǎn)基因大豆中是否產(chǎn)生這種抗凍蛋白，采用的方法是_______________。即使檢測出抗凍蛋白也還需進(jìn)行個(gè)體水平鑒定，可以采用的方法為__________。

（4）通�；�因工程操作主要有4個(gè)步驟，核心步驟是________________。基因工程的定義可以概括為______________________________________________________。

Answer 1

【答案】受傷的 葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞 T—DNA 可以整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上 抗原抗體雜交 將大豆在低溫環(huán)境中種植，觀察生長情況 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型和生物產(chǎn)品

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）由于受傷葉片的傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，這時(shí)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞的染色體上，根據(jù)這一特點(diǎn)，故用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用大豆受傷的葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)。

（2）農(nóng)桿菌細(xì)胞中的Ti質(zhì)粒上有一段特殊序列稱為T-DNA，T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞的染色體上，使目的基因能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在。

（3）若要檢測轉(zhuǎn)基因大豆中是否產(chǎn)生這種抗凍蛋白，在分子水平檢測通常采用抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平鑒定可以采用的方法為：將大豆在低溫環(huán)境中種植，觀察生長情況，若生長良好，說明轉(zhuǎn)基因成功。

（4）基因工程的核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建�；�因工程可以按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型和生物產(chǎn)品。