Question

【題目】科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖所示，請(qǐng)回答相關(guān)問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過___________技術(shù)獲得重組細(xì)胞，通過顯微操作去除MⅡ期卵母細(xì)胞中的核，用微型吸管可一并吸出______________________。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其________________分離出ES細(xì)胞。步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的________________。構(gòu)建之前可以利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，PCR技術(shù)的原理是___________。

（3）將基因?qū)�入ES細(xì)胞常用的方法是_____________。體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同方向分化是利用了ES細(xì)胞的___________。

（4）為檢測(cè)干擾素基因的轉(zhuǎn)錄情況，可采用___________方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功轉(zhuǎn)錄出mRNA。

Answer 1

【答案】 核移植 細(xì)胞核和第一極體 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) （基因）表達(dá)載體 DNA雙鏈復(fù)制 顯微注射 全能性 分子雜交技術(shù)

【解析】試題分析：分析題圖：圖示是利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程，其中①表示通過核移植技術(shù)獲得重組胚胎的過程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程。

（1）根據(jù)以上分析已知，①表示通過核移植技術(shù)獲得重組胚胎的過程；核移植前要先用顯微操作的方法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，并將第一極體也一并除去。

（2）ES細(xì)胞可以從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出來(lái)；步驟③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞時(shí)，需要先構(gòu)建含有目的基因（干擾素基因）的表達(dá)載體；PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因，其原理是DNA雙鏈復(fù)制。

（3）將目的基因?qū)�入ES細(xì)胞（動(dòng)物細(xì)胞）最有效的方法是顯微注射法；體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同方向分化是利用了ES細(xì)胞的全能性。

（4）檢測(cè)干擾素基因的轉(zhuǎn)錄情況，，可采用分子雜交技術(shù)，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功轉(zhuǎn)錄出mRNA。