Question

錢永健在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面有突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)．請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）綠色熒光蛋白基因在該實(shí)驗(yàn)中是作為

 

 基因．
（2）基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒）中的

 

是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（3）上述過程中涉及到的細(xì)胞水平及其以上的現(xiàn)代生物技術(shù)主要有

 

．
（4）在②過程進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的篩選時(shí)，比較簡(jiǎn)易的篩選方法是

 

．
（5）圖中從③到④的過程中一般利用去核后的卵母細(xì)胞作為受體，而不用去核的體細(xì)胞，主要原因是

 

（6）為了獲得多個(gè)相同的克隆兔應(yīng)采用

 

技術(shù)，操作對(duì)象為發(fā)育良好、形態(tài)正常的

 

．
（7）為了從乙兔體內(nèi)一次獲得多個(gè)卵細(xì)胞，往往需要向乙兔體內(nèi)注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是通過

 

調(diào)節(jié)會(huì)抑制下丘腦和垂體的活動(dòng)，從而導(dǎo)致相關(guān)激素分泌量下降，進(jìn)而引起自身性激素分泌量減少，影響排卵．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù),胚胎分割移植

專題：

分析：根據(jù)題意和圖示分析可知：該熒光克隆兔的培育采用了多項(xiàng)生物工程技術(shù)：首先導(dǎo)入目的基因的甲兔的成纖維細(xì)胞要經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞與乙兔的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母兔子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆兔．該過程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．

解答： 解：（1）圖示過程為將發(fā)光水母的綠色熒光蛋白基因進(jìn)行切割，然后與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入兔的體細(xì)胞中，再利用一定的技術(shù)培養(yǎng)為熒光克隆兔．可見，該過程中綠色熒光蛋白基因?qū)儆谀康幕�因�?br />（2）RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)是啟動(dòng)子．
（3）上述過程中，導(dǎo)入目的基因的甲兔的成纖維細(xì)胞要經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞與乙兔的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母兔子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆兔．其中涉及到的細(xì)胞水平現(xiàn)代生物技術(shù)主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植．
（4）②過程為篩選出具有目的基因的細(xì)胞，比較簡(jiǎn)便的方法為在細(xì)胞水平上篩選出能夠發(fā)出綠色熒光的細(xì)胞．
（5）在細(xì)胞核移植過程中一般利用去核后的卵細(xì)胞作為受體，因?yàn)槁鸭?xì)胞中含有能使體細(xì)胞的核基因表達(dá)的物質(zhì)，它的全能性大于體細(xì)胞．
（6）為了獲得多個(gè)相同的克隆兔應(yīng)采用胚胎分割移植技術(shù)，操作對(duì)象為發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．
（7）性激素對(duì)下丘腦和垂體分泌相關(guān)的激素存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)，因此為了從乙兔體內(nèi)一次獲得多個(gè)卵細(xì)胞，往往需要向乙兔體內(nèi)注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)會(huì)抑制下丘腦和垂體的活動(dòng)，從而導(dǎo)致相關(guān)激素分泌量下降，進(jìn)而引起自身性激素分泌量減少，影響排卵．
故答案為：
（1）目的
（2）啟動(dòng)子
（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植
（4）能否發(fā)出綠色熒光
（5）卵細(xì)胞中含有能使體細(xì)胞的核基因表達(dá)的物質(zhì)（或卵細(xì)胞的全能性大于體細(xì)胞）
（6）胚胎分割移植     桑椹胚或囊胚
（7）負(fù)反饋

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖解，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記動(dòng)物核移植的概念及應(yīng)用；識(shí)記胚胎移植的基本程序，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．