Question

回答微生物培養(yǎng)與基因工程相關問題．
Ⅰ、下列實驗設計摸擬了巴斯德的曲頸瓶實驗：把大豆加水煮爛，用兩層紗布濾取豆湯備用；如圖1所示，在三角瓶里注入50mL豆湯，用裝有S型彎玻璃管的藥棉塞住瓶口；再把三角瓶放入盛水的鍋里隔水加熱，使鍋里的水沸騰5min；取出三角瓶冷卻后放在溫暖的陰暗處（日平均溫度在20℃以上）；逐天觀察．
（1）請為本實驗設計對照組：

 

．
（2）如圖2所示裝置中的豆湯在7天后開始腐�。�原因是

 

．
（3）從腐敗豆湯中取培養(yǎng)液分離培養(yǎng)某細菌，在10⁵稀釋度下涂布0.1mL的菌懸液，3個平板上菌落數的平均值是56，則原培養(yǎng)液中的細菌數目是

 

個/毫升．
Ⅱ、生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗，科學家發(fā)現，在微生物M（單細胞）產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如圖3所示）．
（4）篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長提供

 

，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是

 

法．
（5）如圖3所示是采用純化微生物M培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．則獲得圖A效果的接種方法是

 

，圖B效果的接種方法是

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數目的方法是稀釋涂布平板法．

解答： 解：（1）大豆加水煮爛時會殺死其中的微生物，探究實驗需要遵循對照原則，該實驗的實驗組采用了加水煮熟的豆湯，則對照組應用未隔水加熱的豆湯進行相同實驗．
（2）由于少數細菌可能通過棉塞進入三角瓶，同時滅菌時未被殺死的芽孢開始繁殖，因此如圖2所示裝置中的豆湯在7天后開始腐�。�
（3）菌落數的平均值是56，稀釋倍數10⁵，所用稀釋液的體積為0.1ml，則菌落數=（56÷0.1）×l0⁵=5.3×10⁷ 個．
（4）篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長提供碳源；培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法．
（5）接種微生物常用的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法，獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B效果的接種方法是平板劃線法．
故答案為：
（1）用未隔水加熱的豆湯進行相同實驗，一段時間后去除曲頸進行相同實驗
（2）少數細菌可能通過棉塞進入三角瓶，同時滅菌時未被殺死的芽孢開始繁殖
（3）5.6×10⁷
（4）碳源    高壓蒸汽滅菌
（5）稀釋涂布平板法    平板劃線法

點評：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記滅菌技術，掌握實驗室介質微生物常用的方法，能根據圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．