Question

4．農(nóng)作物秸稈除了作為動物飼料，還可用于微生物發(fā)酵，獲得燃料乙醇．回答下列問題：
（1）纖維素分解菌能分泌纖維素酶，因此常用于作物秸稈的初期處理．纖維素酶主要包括的三種組分是C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中能將纖維二糖分解成葡萄糖的是葡萄糖苷酶．
（2）通常在的地方采集土樣，用于實驗室中分離纖維素分解菌，篩選纖維素分解菌時常采用剛果紅染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)來對微生物進(jìn)行篩選．
（3）若要對用于后期發(fā)酵的酵母菌進(jìn)行計數(shù)，可在顯微鏡下用直接計數(shù)；若要測定活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法法進(jìn)行計數(shù)．某同學(xué)用0.1mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為10⁵的平板中測得菌落數(shù)的平均值為112，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是1.12×10⁸個．

Answer 1

分析 1、纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖．
2、在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．
3、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)； ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)．
③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)．

解答 解：（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中的C₁酶和C_x酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖．
（2）剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成，則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，因此篩選纖維素分解菌時常采用剛果紅染色法．
（3）若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)．某同學(xué)用0.1mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為10⁵的平板中測得菌落數(shù)的平均值為112，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是112×10⁵×10=1.12×10⁸個．
故答案為：
（1）C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶         葡萄糖苷酶
（2）剛果紅染色
（3）稀釋涂布平板法      1.12×10⁸

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記纖維素酶的組成及功能；識記篩選分解纖維素的微生物的方法；識記接種微生物常用的兩種方法．