Question

14．約翰•伯特蘭•戈登和山中伸彌因在“體細胞重編程技術”領域做出革命性貢獻而獲得諾貝爾生理學或醫(yī)學獎．請回答下列問題：
（1）1962年約翰•伯特蘭•戈登通過實驗把蝌蚪腸上皮細胞的細胞核移植進入去核的卵細胞中，成功培育出“克隆青蛙”．因動物細胞的全能性會隨著動物細胞分化程度的提高而逐漸降低，但此實驗說明已高度分化的動物體細胞的細胞核仍具有發(fā)育全能性．更多的實驗證明，到目前還不能用類似植物組織培養(yǎng)技術（克隆植物的方法）獲得克隆動物．
（2）所謂“體細胞重編程技術”是將體細胞重新誘導回早期干細胞狀態(tài)，即獲得誘導性多能干（iPS）細胞．山中伸彌把4個關鍵基因轉讓小鼠的成纖維細胞，并整合到染色體的DNA上，使其轉變成iPS細胞；為確定基因是否進入成纖維細胞可用DNA分子雜交技術檢測．
（3）在研究中可通過動物細胞培養(yǎng)技術獲取大量iPS細胞，該過程一般需先加入胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理一段時間，分散成單個細胞，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)；另外，iPS細胞還需置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是維持培養(yǎng)液pH值（相對穩(wěn)定）．

Answer 1

分析 1、細胞分化程度越高，全能性越低；由于動物體細胞全能性受限制，因而直到今天也還不能用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動物個體；通過克隆技術獲得的動物實際上是通過核移植實現(xiàn)的．
2、外源基因進入受體細胞得通過構建基因表達的載體來實現(xiàn)．構建基因表達的載體除了目的基因外還需要載體、工具酶．通過基因表達載體的協(xié)助，最終可使外援基因整合到受體細胞的染色體DNA上．

解答 解：（1）動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖．根據(jù)題意分析可知：由于動物細胞的全能性會隨著動物細胞分化程度的提高而逐漸受到限制，所以不能用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動物個體；培育的“克隆青蛙”，實際是通過核移植來實現(xiàn)的，表明動物細胞的細胞核具有全能性．
（2）在基因工程中常用的運載體有質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．所以逆轉錄病毒是基因進入成纖維細胞的載體，并整合到其染色體DNA上．為確定基因是否進入成纖維細胞可用DNA分子雜交技術檢測．
（3）獲取大量iPS細胞可通過動物細胞培養(yǎng)技術，該過程一般需先加入胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理一段時間，分散成單個細胞，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)．二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是維持培養(yǎng)液pH值．
故答案為：
（1）降低   細胞核   植物組織培養(yǎng)
（2）DNA    DNA分子雜交
（3）動物細胞培養(yǎng)    胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）    維持培養(yǎng)液pH值（相對穩(wěn)定）

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)、基因工程、細胞分化等相關知識，意在考查學生識記和理解能力，難度不大．