Question

4．（1）限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點(diǎn)．
①畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性未端：
②畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后形成的黏性未端．
③在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性未端能否連接起來？為什么？能，因?yàn)樗鼈冇邢嗤�的粘性末端�?br />（2）基因工程技術(shù)在培育抗旱植物用于發(fā)展沙漠農(nóng)業(yè)和沙漠改造方面顯示了良好的前景，荷蘭一家公司將大腸桿菌中的海藻糖合成酶基因?qū)�入植物（如甜菜、馬鈴薯等）中并獲得有效表達(dá)，使“工程植物”增強(qiáng)耐旱性和耐寒性．
（1）根據(jù)材料中表達(dá)，使“工程植物”增強(qiáng)耐旱性、耐寒性的基本操作步驟是：
①獲取目的基因，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的檢測和表達(dá)．
（2）寫出酶基因在植物體內(nèi)的表達(dá)過程：海藻糖合成酶基因$\stackrel{轉(zhuǎn)錄}{→}$mRNA$\stackrel{翻譯}{→}$海藻糖合成酶．

Answer 1

分析 關(guān)于限制酶，考生可以從以下幾方面把握：
（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來．
（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．

解答 解：（1）①限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，因此質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端為：．
②限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，因此目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端為：．
③限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)不同，但兩種切割形成的黏性末端相同，因此可在DNA連接酶的作用下連接起來．
（2）①基因工程的操作步驟為：獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測和表達(dá)．
②基因表達(dá)的過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個階段．
故答案為：
（1）①
②
③能    因?yàn)樗鼈冇邢嗤�的粘性末�?br />（2）①獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測和表達(dá)
②海藻糖合成酶基因$\stackrel{轉(zhuǎn)錄}{→}$mRNA$\stackrel{翻譯}{→}$海藻糖合成酶

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握基因工程各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題；識記限制酶的作用特點(diǎn)，能結(jié)合限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列及切割位點(diǎn)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．