Question

天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B．現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，下列操作正確的是（　�。�

• A、提取矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA，再擴增基因B
• B、利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因B
• C、利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞
• D、將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并將入玫瑰細胞

Answer 1

考點：基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：本題考查基因工程應(yīng)用的有關(guān)知識，矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA，再擴增基因B，控制藍色色素的合成，從而培育出藍玫瑰．

解答： 解：A、是可行方案的前半部分，后面應(yīng)該包括把擴增到的基因B克隆到雙元載體，轉(zhuǎn)基因到玫瑰花細胞的操作，A正確；
B、如果已經(jīng)從基因文庫中篩選出含有基因B的克隆，可以用限制性核酸內(nèi)切酶酶切獲取基因B片段，實際上，對序列未知的情況下，這樣得到的序列比逆轉(zhuǎn)錄后擴增更少突變，能更準確得到基因B的序列；基因文庫的序列含有內(nèi)含子，雖然都是植物，但不一定有相同的轉(zhuǎn)錄后加工系統(tǒng)，而且含有內(nèi)含子的序列往往長很多，不利于完成后面的克隆表達實驗操作，B錯誤；
C、通常用T4 DNA連接酶將基因B與質(zhì)粒連接，利用DNA聚合酶來連接是不行的，但如果把答案中的連接理解為重組克隆，現(xiàn)在是有辦法用DNA聚合酶克隆的，但用這種方法一般是轉(zhuǎn)到有修復(fù)缺刻功能細菌，直接轉(zhuǎn)玫瑰細胞不行，C錯誤；
D、基因B如果已經(jīng)拿到并克隆到載體上，也應(yīng)該轉(zhuǎn)化大腸桿菌后通過三親本雜交或二親本雜交把基因轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，或直接把DNA電擊轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌．因為大腸桿菌不能完成感染并把基因轉(zhuǎn)入玫瑰細胞，D錯誤．
故選：A

點評：從題干提示基因B序列已知，用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，最簡單的方法是答案A，逆轉(zhuǎn)錄后PCR擴增的路線，其次是基因文庫的序列含有內(nèi)含子，雖然都是植物，但不一定有相同的轉(zhuǎn)錄后加工系統(tǒng)，而且含有內(nèi)含子的序列往往長很多，不利于完成后面的克隆表達實驗操作．所以答案B不是一個好的路線，特別是序列已經(jīng)知道，沒有必要再這么做．