Question

【題目】抗體是一種由漿細(xì)胞分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的一類蛋白質(zhì)。下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個途徑模式簡圖

（1）在制備抗體1的過程中，先給小鼠注射一種純化的抗原蛋白，一段時間后，從小鼠的_________ (填“骨髓”或“脾臟”)中獲取B淋巴細(xì)胞，將獲得的細(xì)胞與________細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的Y細(xì)胞。

（2）在制備抗體2的過程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是________________________。導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞中的鼠基因能表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，原因是______________________。

（3）抗體2制備過程中將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進(jìn)行PCR擴(kuò)增被稱為RT-PCR技術(shù)，RT-PCR過程需要的酶有______________。將V1基因與普通質(zhì)粒經(jīng)某種限制酶切割連接并成功導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)仍有部分細(xì)胞不能表達(dá)出抗體2，最可能的原因是_______。

（4）可用______________法檢測受體細(xì)胞中是否真正成功表達(dá)了病毒S蛋白。上述制備抗體1和2過程中用到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段主要有_______________________________。

Answer 1

【答案】 脾臟 骨髓瘤 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代 所有生物共用一套遺傳密碼 逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶 目的基因與質(zhì)粒載體反向拼接 抗原―抗體雜交 生產(chǎn)單克隆抗體、基因工程

【解析】

據(jù)圖分析，細(xì)胞A表示效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞），細(xì)胞Y表示雜交瘤細(xì)胞，①過程表示動物細(xì)胞融合，②過程表示動物細(xì)胞培養(yǎng)，③過程表示提取信使RNA，④過程表示逆轉(zhuǎn)錄，⑤表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑥表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（1）在制備單克隆抗體的過程中，B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）是從已免疫的小鼠脾臟中提取的；Y細(xì)胞是可以分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，是漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、篩選獲得的。

（2）圖中抗體2是通過基因工程技術(shù)獲得的，該過程中構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代；導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞中的鼠基因能表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，說明不同的生物是共用一套遺傳密碼的。

（3）將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA的過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因需要Taq酶的催化。根據(jù)題意，將目的基因與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入大腸桿菌后，有部分細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體2，可能是因為目的基因與質(zhì)粒載體反向拼接，導(dǎo)致其不能正確表達(dá)。

（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，可以用抗原抗體雜交法進(jìn)行檢測；圖示制備抗體的過程涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)有基因工程、動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等。