Question

【題目】利用生物工程技術(shù)，可從轉(zhuǎn)基因奶山羊乳汁中分離獲得人凝血因子IV，用于血友病的治療。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）根據(jù)凝血因子IV基因上游和下游的堿基序列，可用_____________技術(shù)獲取并擴(kuò)增基因；構(gòu)建該基因表達(dá)載體時(shí)，所用到的工具酶是_____________，將人凝血因子IV基因與_____________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件組在一起。

（2）將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入奶山羊受精卵的常用方法是__________________________。

（3）在體外胚胎培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)選用囊胚的_______________________進(jìn)行DNA分析，用于選擇雌性胚胎。此期的胚胎也適于胚胎分割移植，此技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是_______________________。

（4）人凝血因子IV是一種胞外酶，該蛋白的加工是在________________________等細(xì)胞器上進(jìn)行的。人凝血因子IV只在乳腺細(xì)胞合成的原因是____________________________

Answer 1

【答案】PCR 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 乳腺蛋白基因 顯微注射 滋養(yǎng)層細(xì)胞 提高胚胎的利用率 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 基因的選擇性表達(dá)

【解析】

啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)；終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。分泌蛋白的合成、加工和運(yùn)輸過(guò)程：最初是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行加工，形成有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)由囊泡包裹著到達(dá)高爾基體，高爾基體對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步加工，然后形成囊泡分泌到細(xì)胞外。在做胚胎性別鑒定時(shí)，需要取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，進(jìn)行性別鑒定。

（1）可以根據(jù)基因編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物，用PCR技術(shù)進(jìn)行體外大量擴(kuò)增獲得目的基因；構(gòu)建該基因表達(dá)載體時(shí)，需要利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，將人凝血因子IV基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件組在一起，以便于基因的正常表達(dá)。

（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞（入奶山羊受精卵）最有效的方法是顯微注射法。

（3）在做胚胎性別鑒定時(shí)，一般取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，進(jìn)行性別鑒定；胚胎分割移植技術(shù)可以提高胚胎的利用率。

（4）人凝血因子IV屬于分泌蛋白，分泌蛋白的合成過(guò)程中需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的加工；由于基因的選擇性表達(dá)，人凝血因子IV只在乳腺細(xì)胞合成。