Question

(2006山東濰坊統(tǒng)考) 凝膠色譜技術(shù)是20世紀(jì)60年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、不需要有機(jī)溶劑、對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

參照右上圖，完成問(wèn)題：

(1)a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來(lái)的是________，原因是　　　　　　　　　。

(2)自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部d位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由______替代。

(3)裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是________________________。

(4)若選用SephadexG100，則“G”表示　　　　　　　，100表示__________________。

(5)洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體______（相同/不同），洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求是______。

 

Answer 1

（1）a　a相對(duì)分子質(zhì)量大，無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快（2）尼龍網(wǎng)和尼龍紗�。�3）氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果　（4）凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍　凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水10 g�。�5）相同　保持穩(wěn)定

 

考查凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理、色譜柱的制作材料、裝填色譜柱的注意事項(xiàng)、洗脫液的使用等知識(shí)。