Question

9．國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升酸奶產(chǎn)品中乳酸菌菌數(shù)不得低于1×10⁶．為了解某酸奶中的乳酸菌含量是否達到國家標(biāo)準(zhǔn)，某興趣小組進行了如下實驗，請回答下列問題：
（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基的碳源為含碳有機物（填“含碳無機物”或“含碳有機物”）．檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格的方法是取若干滅菌后未接種的培養(yǎng)基（或空白平板）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生長．
（2）樣品稀釋：先將樣品稀釋10倍，可用無菌移液管吸取25mL酸奶樣品加入盛有225mL無菌水的三角瓶中，使樣品與水充分混勻．然后進行系列稀釋操作，得到稀釋至10⁶、10⁷、10⁸倍的樣品．
（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計：吸取不同稀釋度的樣品各1mL，分別置于不同培養(yǎng)皿內(nèi)，加入適宜溫度的溶化狀態(tài)的培養(yǎng)基，使之混合均勻，冷卻成平板．每個稀釋度做3個重復(fù)．在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，對平板的菌落數(shù)進行統(tǒng)計，結(jié)果如表：

稀釋度（倍）	106			107			108
平板	1	2	3	1	2	3	1	2	3
平板菌落數(shù)（個）	432	421	445	78	67	74	9	6	8

為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)選擇上述稀釋度為10⁷倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計結(jié)果，計算出樣品中每毫升乳酸菌數(shù)為7.3×10⁸．
（4）測定微生物的數(shù)量常采用稀釋涂布平板法，其統(tǒng)計的數(shù)值往往比實際數(shù)目低，原因是兩個或多個細(xì)胞連在一起，觀察到的只是一個菌落．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．由于兩個或多個細(xì)胞連在一起，觀察到的只是一個菌落，因此其統(tǒng)計的數(shù)值往往比實際數(shù)目偏低．

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，該實驗?zāi)康臑榱私饽乘崮讨械娜樗峋�含量是否達標(biāo)，而乳酸菌屬于異養(yǎng)型生物，因此培養(yǎng)基的碳源為含碳有機物．檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，可取若干滅菌后未接種的培養(yǎng)基（或空白平板）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生長．
（2）先將樣品稀釋10倍，即酸奶樣品體積：無菌水體積=1：9，即可用無菌移液管吸取25mL酸奶樣品加入盛有25×9=225mL無菌水的三角瓶中，使樣品與水充分混勻．
（3）稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，應(yīng)選擇30-300的菌落數(shù)進行計數(shù)，因此應(yīng)選擇上述稀釋度為10⁷倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計結(jié)果，計算出樣品中每毫升乳酸菌數(shù)=（78+67+74）÷3×10⁷=7.3×10⁸．
（4）測定微生物的數(shù)量常采用稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細(xì)胞連在一起，觀察到的只是一個菌落，因此其統(tǒng)計的數(shù)值往往比實際數(shù)目低．
故答案為：
（1）含碳有機物    取若干滅菌后未接種的培養(yǎng)基（或空白平板）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生長
（2）225
（3）10⁷        7.3×10⁸
（4）低    兩個或多個細(xì)胞連在一起，觀察到的只是一個菌落

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生掌握培養(yǎng)基配制的原則，識記分離和純化微生物常用的兩種方法，掌握采用稀釋涂布平板法計數(shù)微生物的具體過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．