Question

1．將天然蝦青素基因導入番茄細胞中，獲得富含蝦青素的轉基因番茄．回答下列問題：
（1）天然蝦青素能有效清除細胞內的自由基，延緩（細胞）衰老．
（2）天然蝦青素基因可以從基因組文庫中提取，基因組文庫與cDNA文庫相比，基因中具有啟動子和內含子．
（3）天然蝦青素基因提取后，一般用PCR技術擴增，PCR擴增過程中，需加熱至90～95℃，其目的是解鏈（為單鏈）；加熱至70～75℃時，互補鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合（或“Taq”）酶的作用下延伸．
（4）將蝦青素基因導入番茄細胞，常采用農桿菌轉化法，該方法是將目的基因插入Ti質粒上的T-DNA，使目的基因進入植物細胞．
（5）檢測蝦青素基因是否翻譯成蛋白質，采用的方法是抗原-抗體雜交．
（6）番茄細胞轉化成功后，經植物組織培養(yǎng)，通過脫分化形成愈傷組織，再分化獲得轉基因植株．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）細胞衰老的原因之一是由于細胞內自由基的增多，故天然蝦青素能有效清除細胞內的自由基，延緩細胞衰老．
（2）目的基因可以從基因組文庫中提取，基因組文庫與cDNA文庫相比，cDNA文庫中基因不具有啟動子和內含子．
（3）目的基因體外擴增一般用PCR技術，PCR擴增過程中，需加熱至90～95℃使其變性，其目的是使DNA解成單鏈，加熱至70～75℃時，互補鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下延伸．
（4）將蝦青素基因導入番茄細胞，常采用農桿菌轉化法，該方法是將目的基因插入Ti質粒上的T-DNA，使目的基因進入植物細胞．
（5）檢測蝦青素基因是否翻譯成蛋白質，采用的方法是抗原-抗體雜交．
（6）番茄細胞轉化成功后，需經植物組織培養(yǎng)，通過脫分化形成愈傷組織，再經過再分化獲得轉基因植株．
故答案為：
（1）（細胞）衰老
（2）啟動子 
（3）解鏈（為單鏈）   熱穩(wěn)定DNA聚合 （或“Taq”）
（4）農桿菌轉化       Ti質粒上的T-DNA
（5）抗原-抗體雜交
（6）愈傷組織

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)，能結合題干信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．