【題目】下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖 1、圖 2 中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題:

(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用____________________兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過______________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入經(jīng)____________處理過的_____________態(tài)的大腸桿菌中。

(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加________________________。平板上長出的菌落,常用 PCR 鑒定,所用的引物組成為圖2中的_____________。

(3)若BamH I 酶切的 DNA 末端與 Bcl I 酶切的 DNA 末端連接,連接部位的 6 個堿基對序列為______________________,對于該部位,這兩種酶__________(填“都能”、 “都不能”或“只有一種能”)切開。

(4)若用 Sau3A I 切圖 1 質(zhì)粒最多可能獲得________________種大小不同的 DNA 片段。

(5)圖1中啟動子的作用是__________________________________________________________。

(6)將目的基因?qū)朊藁?xì)胞,培育抗蟲棉的過程涉及到哪些技術(shù):_______________________________

【答案】Bcl I和Hand IIIDNA連接Ca+感受四環(huán)素引物甲和引物丙都不能7為RNA聚合酶提供識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄基因工程技術(shù)(轉(zhuǎn)基因技術(shù))和植物組織培養(yǎng)技術(shù)

【解析】

分析圖1:外源DNA上含有限制酶BclI、BamH、HindIIISau3AI的切割位點,其中限制酶BclI、BamH、HindIII的識別序列都能被Sau3kI識別。分析圖2:質(zhì)粒上有限制酶BclI、BamH、HindIII三種限制酶的識別序列和切割位點,其中BamHⅠ的切割位點位于兩種抗生素抗性基因上,而抗性基因為載體的標(biāo)記基因,因此不可用該酶切割。在目的基因上,Bcl、BamHI、HindⅢ和Sau3AⅠ四種酶也存在酶切位點

(1)選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩端存在識別位點,但BamHⅠ可能使質(zhì)粒中的啟動子丟失,且會破壞質(zhì)粒中的兩個抗性基因;Sau3AI在質(zhì)粒上有三個酶切位點,也會破壞質(zhì)粒中的兩個抗性基因,不利于后期的篩選,所以應(yīng)選用限制酶為BclⅠ和Hind 。選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩側(cè)切割,切割后的DNA片段用DNA連接酶連接。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入經(jīng)鈣離子處理過的感受態(tài)的大腸桿菌中。

(2)由上一問的討論可知,重組質(zhì)粒的氨芐青霉素抗性基因已經(jīng)破壞,僅保留了四環(huán)素抗性基因,為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加四環(huán)素。平板上長出的菌落,常用PCR鑒定,目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物需要與單鏈兩端相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,故所用引物組成是圖2中的引物甲和引物丙。

(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端和BclⅠ酶切的DNA末端連接,連接部位的6個堿基對序列為,由于兩種酶均不能識別該部位的堿基對序列,所用兩種酶都不能切開該部位。

(4)根據(jù)BclI、BamHⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點,Sau3AⅠ在質(zhì)粒上有三個酶切位點,完全酶切可得到記為A、B、C三種片段,若部分位點被切開,可得到AB、AC、BC、ABC四種片段,所以用Sau3AⅠ切質(zhì)粒最多可能獲得7種大小不同的DNA片段。

(5)啟動子的作用是為RNA聚合酶提供識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄。

(6)將目的基因?qū)朊藁?xì)胞,需要基因工程技術(shù)(轉(zhuǎn)基因技術(shù));將得到的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成抗蟲棉植株的過程涉及到植物組織培養(yǎng)技術(shù)

練習(xí)冊系列答案
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【題目】某地農(nóng)村利用水葫蘆生態(tài)池污水處理系統(tǒng)對農(nóng)村生活污水進(jìn)行凈化,主要工藝流程如下圖所示。 請回答下列問題:

(1)農(nóng)村生活污水的主要污染物是____________(填“有機(jī)污染物”“重金屬污染物”或“有毒污染物”)。形成水體富營養(yǎng)化的主要元素是____________。

(2)生態(tài)池中微生物的主要作用是____________。

(3)生態(tài)池作為具有觀賞性的景觀,吸引了大批游人前來觀光、休閑,這體現(xiàn)了生物多樣性的_______價值。

(4)運行過程中必須及時清除枯死的水葫蘆,以防止其腐爛下沉,____________并造成對下一年的潛在危害,同時要避免水葫蘆外逃,防止________________________。

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【題目】圖表示生物體內(nèi)部分物質(zhì)之間的變化,下列說法正確的是

A. 過程a只能在植物葉肉細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行

B. 過程a、b、c、d都可能在植物細(xì)胞內(nèi)完成

C. 過程b只能在植物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行

D. 過程d只有高等動物和乳酸菌能進(jìn)行

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】我們?nèi)粘E胝{(diào)中使用的味精主要成分是谷氨酸鈉,已知谷氨酸分子的R基為—C3H5O2,則一分子谷氨酸中含有的C、H、O、N原子數(shù)依次是( )

A. 5、9、4、1

B. 4、8、5、1

C. 5、8、4、1

D. 4、9、4、1

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【題目】關(guān)于人體激素的敘述,錯誤的是( )

A. 激素在人體內(nèi)作為信息物而發(fā)揮作用

B. 激素在人體內(nèi)含量較低,但有高效的生物催化作用

C. 人體激素產(chǎn)生后沒有專門的導(dǎo)管運輸,而是彌散到體液中

D. 正常人體內(nèi),激素的分泌受反饋調(diào)節(jié)

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【題目】正常人口服葡萄糖及持續(xù)靜脈注射葡萄糖后,血漿中葡萄糖和胰島素濃度的變化情況如下圖所示,相關(guān)敘述錯誤的是

A. 持續(xù)靜脈注射葡萄糖是模擬口服葡萄糖后血漿中葡萄糖濃度的變化

B. 口服葡萄糖和靜脈注射葡萄糖都能使血漿葡萄糖濃度升高

C. 口服葡萄糖后血漿中胰島素的含量大大高于靜脈注射者

D. 腸道中的葡萄糖能直接刺激胰島B細(xì)胞分泌胰島素

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某固氮藍(lán)藻具有耐鹽的特性,常用于鹽堿土的生態(tài)修復(fù)。

(1)固氮藍(lán)藻的結(jié)構(gòu)如圖所示,其營養(yǎng)細(xì)胞中含有的葉綠素a能夠吸收和轉(zhuǎn)化_______;異形胞中含有的固氮酶能夠?qū)⒋髿庵械牡獨廪D(zhuǎn)化為含氮無機(jī)物,用于合成自身的_______(答出兩類)等小分子有機(jī)物。

(2)固氮酶對氧氣很敏感,在空氣中很快失活。與營養(yǎng)細(xì)胞相比,異形胞包被加厚,呼吸速率增加,這些變化有利于_______,以保證固氮作用的進(jìn)行。

(3)研究人員測定不同Na2CO3濃度條件下固氮藍(lán)藻的生長規(guī)律,結(jié)果如下圖所示。

①以葉綠素a作為固氮藍(lán)藻生長量的衡量指標(biāo),固氮藍(lán)藻的生長量呈_______型曲線增長。

②隨著Na2CO3濃度的增加,葉綠素a、胞外多糖和固氮酶活性的變化趨勢_______

③隨著培養(yǎng)天數(shù)增加,在第14~28天期間,固氮藍(lán)藻生長最旺盛,這是因為_______。在固氮藍(lán)藻生長的穩(wěn)定期,葉綠素a含量的增長已經(jīng)基本停止,而_______的含量仍然繼續(xù)增長,推測其與固氮藍(lán)藻的耐鹽性有關(guān)。

(4)固氮藍(lán)藻在生長過程中,大量利用土壤溶液中的CO32-,使得土壤pH_______;不斷分泌氨基酸、糖類等有機(jī)物質(zhì),并在死亡后被_______分解,釋放出大量的NH4+,提高了土壤肥力,從而有利于鹽堿土的生態(tài)修復(fù)。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】神經(jīng)元細(xì)胞膜內(nèi)外的離子可以影響膜電位和突觸傳遞過程,如細(xì)胞內(nèi)Ca2+的升高促進(jìn)突觸小泡向突觸前膜移動,而K+流出細(xì)胞將會導(dǎo)致細(xì)胞膜內(nèi)電位更負(fù)。則下列情形中不利于神經(jīng)遞質(zhì)釋放的是

A. Na+流入細(xì)胞內(nèi)B. Ca2+流入細(xì)胞內(nèi)

C. K+流出細(xì)胞D. 突觸小泡與突觸前膜融合

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖為人體內(nèi)水分調(diào)節(jié)、體溫調(diào)節(jié)、血糖調(diào)節(jié)示意圖,圖中①②③④為激素。下列敘述不正確的是(  )

A. 下丘腦是內(nèi)分泌的樞紐,可控制其他激素的分泌

B. 血液中③的濃度過低時,①②激素含量增加

C. 飲水不足時,激素④分泌減少

D. 下丘腦對胰島細(xì)胞的控制和垂體細(xì)胞的控制方式不同

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