Question

9．某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因．利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題：
（1）從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用PCR技術進行擴增．將抗鹽基因?qū)�入煙草細胞�?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理基因重組．
（2）如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能復制，也不能轉(zhuǎn)錄．
（3）在構建重組質(zhì)粒時，應選用SalⅠ和HindⅢ兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性．
（4）為了確定抗鹽煙草培育成功，既要用放射性同位素標記的抗鹽基因作探針進行分子雜交檢測，又要用抗原-抗體雜交的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點．
在質(zhì)粒上，這三種限制酶的切割位點都位于抗四環(huán)素基因上，用其任何一種酶都會破壞四環(huán)素抗性基因；在含抗鹽基因的DNA片段上，BamHⅠ位于目的基因上，用BamHⅠ切割會破壞目的基因．

解答 解：（1）從基因文庫中獲得的目的基因可用PCR技術進行擴增．將抗鹽基因?qū)�入煙草細胞�?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是基因重組．
（2）如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，培育出的煙草植株不具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能復制和轉(zhuǎn)錄，所以需要構建基因表達載體．
（3）只要SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質(zhì)粒，形成相同的黏性末端，容易發(fā)生自身連接和反向接入；HindⅢ會破壞目的基因；則在構建重組質(zhì)粒時，應選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性．
（4）探針是指用放射性同位素標記的目的基因（抗鹽基因）．除了從分子水平上進行檢測，還可以從個體水平上進行鑒定，即用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株來鑒定煙草的耐鹽性．
故答案為：
（1）PCR 基因重組
（2）復制  轉(zhuǎn)錄
（2）SalⅠ和HindⅢ質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA
（3）終止子 RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點并驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 鑒定受體細胞中是否含有目的基因并篩選出含目的基因的受體細胞
（4）抗鹽基因   抗原-抗體雜交

點評 本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關知識，意在考查學生識圖能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力．