Question

12．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡凋節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用，科研人員現(xiàn)在能利用轉(zhuǎn)基因奶牛的乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑（tPA）．回答下列相關(guān)問題：
（1）為了獲得更多的tPA基因，可對其進行體外“克隆”，該技術(shù)指的是PCR技術(shù)．
（2）在構(gòu)建的基因表達載體中，應將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件結(jié)合．將目的基因?qū)�入動物細胞常用的方法是顯微注射法．
（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛的過程中，應取囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，選用雌性胚胎，通過胚胎移植技術(shù)，將早期胚胎移入代孕母牛的子宮內(nèi)．從個體水平上看，若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．
（4）若從囊胚的內(nèi)細胞團可分離出ES細胞，培養(yǎng)ES細胞時，培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，可以分化為不同類型的細胞．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）PCR的原理是DNA復制，需要的條件包括：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）PCR擴增DNA的過程包括：高溫變性、低溫復性、中溫延伸過程．
2、“乳腺生物反應器”的優(yōu)點是：
（1）動物的基因組成和人類相似，從人類染色體上切下來的任何基因都可以直接轉(zhuǎn)移到動物體內(nèi)．
（2）動物乳腺細胞可以是任何基因正確表達，并正確進行后加工．
（3）用動物乳腺生產(chǎn)外源蛋白質(zhì)產(chǎn)量很高．用動物乳腺生產(chǎn)藥品不需要產(chǎn)品提純，不需要復雜設(shè)備，動物吃的是草，生產(chǎn)的是奶，奶中含有珍貴的蛋白質(zhì)，因此，“乳腺生物反應器”是人們公認的、最理想的生物反應器．

解答 解：（1）基因工程中，在體外擴增目的基因常利用PCR技術(shù)．
（2）要利用奶牛乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑（tPA），在構(gòu)建的基因表達載體中，應將tPA基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件結(jié)合，使目的基因在乳腺組織中特異性表達．將目的基因?qū)�入動物細胞常用的方法是顯微注射法．
（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛的過程中，奶牛必須是雌性的，應取囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，選用雌性胚胎，通過胚胎移植技術(shù)，將早期胚胎移入代孕母牛的子宮內(nèi)．從個體水平上看，若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．
（4）若從囊胚的內(nèi)細胞團可分離出ES細胞，培養(yǎng)ES細胞時，培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，可以分化為不同類型的細胞．
故答案為：
（1）PCR
（2）乳腺蛋白    顯微注射法
（3）性別    胚胎移植    轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑
（4）分化誘導因子

點評 本題綜合考查基因工程、動物體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記動物細胞核移植和動物細胞培養(yǎng)的原理；識記胚胎移植的生理學基礎(chǔ)及基本程序，能準確判斷圖中各過程的名稱，再結(jié)合所學的知識答題．