Question

【題目】下圖1是某學(xué)生重復(fù)艾弗里證明DNA是遺傳物質(zhì)實驗的其中一組實驗；下圖2是基因工程中運(yùn)用影印法將培養(yǎng)基A上的菌落按原來方向印在培養(yǎng)基B上，以檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入大腸桿菌的示意圖。回答下列問題：

（1）圖1、圖2的培養(yǎng)結(jié)果顯示，兩實驗中使用的均為________(填物理狀態(tài)）培養(yǎng)基。

（2）在配制圖2中的培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)、pH、滲透壓等條件外，還要考慮在培養(yǎng)基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”）種類的抗生素。在配制培養(yǎng)基和倒平板的過程中，下列選項需要的有__________(填序號：①酒精燈，②接種環(huán)，③培養(yǎng)皿）。

（3）培養(yǎng)基滅菌是避免雜菌污染的有效途徑之一。適用于圖1、圖2所示培養(yǎng)基的滅菌方法是_______；接種前還需檢測滅菌效果，方法是將未接種的培養(yǎng)基置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上________________。

（4）實驗證明，上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉(zhuǎn)化率都很低，為獲得圖1、圖2所示的培養(yǎng)結(jié)果，一是要設(shè)法提高圖1中S型菌的_________；二是要使用恰當(dāng)?shù)姆椒ń臃N。兩實驗都不能用稀釋涂布平板法接種，而應(yīng)采用菌液直接涂布平板和影印法接種肺炎雙球菌和大腸桿菌，理由是__________。接種培養(yǎng)4天后，可通過觀察菌落的形態(tài)特征來識別肺炎雙球菌和大腸桿菌。

Answer 1

【答案】 固體 不同 ② 高壓蒸汽滅菌 是否有菌落產(chǎn)生 DNA純度 稀釋會導(dǎo)致菌種數(shù)量極少而無法觀察到轉(zhuǎn)化成功的菌落

【解析】

據(jù)圖分析，圖1中R型菌的培養(yǎng)基中加入了R型菌和S型菌DNA，結(jié)果是培養(yǎng)基上同時出現(xiàn)了R型菌和S型菌，說明S型菌DNA將R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌；圖2是基因工程中運(yùn)用影印法將培養(yǎng)基A上的菌落按原來方向印在培養(yǎng)基B上，以檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入大腸桿菌的示意圖，培養(yǎng)基B中應(yīng)該加入了相應(yīng)的抗生素檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入了受體細(xì)胞，結(jié)果是1、2、3生存下來了，而4消失了，說明前三者導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，而后者沒有。

（1）從圖1、圖2可以看出，兩實驗中使用的都是固體培養(yǎng)基。

（2）要檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入大腸桿菌，檢測的依據(jù)一般是重組質(zhì)粒的抗性發(fā)生了改變，因此在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B中應(yīng)加入不同種類的抗生素。在配制含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過程中，不需要接種環(huán)（②）。

（3）對培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法；接種前需要檢測滅菌效果，其方法是進(jìn)行空白對照，將未接種的培養(yǎng)基置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（4）上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉(zhuǎn)化率都很低，為獲得圖1、圖2所示的培養(yǎng)結(jié)果，一是要提高圖1 中S型菌的DNA純度；二是要使用恰當(dāng)?shù)姆椒ń臃N，不選用平板劃線法和稀釋涂布平板法，而采用不加稀釋的涂布平板法接種肺炎雙球菌和大腸桿菌，是因為這兩種方法都可能因稀釋后菌種數(shù)量極少而無法觀察到轉(zhuǎn)化成功的菌落。