Question

苦馬豆素（SW）最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得，為了研究SW是否具有抑制腫瘤細胞生長的作用，許多學(xué)者做了大量研究，請根據(jù)以下實驗研究過程及研究結(jié)果回答問題．
①取小鼠肝癌Hepal-6細胞
②制成單細胞懸液，接種于多孔板，加入等量培養(yǎng)液，每組設(shè)5個平行孔
③于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h
④加入等量不同濃度SW溶液，于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)
⑤分別在24h、48h、72h時吸取培養(yǎng)液，觀察結(jié)果，得到不同濃度SW對細胞存活率影響曲線（圖1）
⑥將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心，細胞染色，在熒光顯微鏡下觀察拍照，記錄正常細胞和凋亡細胞數(shù)目，并采用免疫熒光細胞技術(shù)檢測細胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表達量狀況，匯總統(tǒng)計結(jié)果（表1）
（1）實驗中首先將小鼠肝癌Hepal-6細胞制成單細胞懸液，于37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是

 

．
（2）實驗中對照組的處理方法應(yīng)為

 

，利用多孔板培養(yǎng)時，每組設(shè)置5個平行孔同時進行培養(yǎng)，計數(shù)后統(tǒng)計平均值是為了

 

．
（3）分析圖1中曲線可知，SW對肝癌Hepal-6細胞作用效果的特點是：

SW（μg/mL）	癌細胞數(shù)目	凋亡細胞數(shù)目	Bax蛋白	Bcl-2蛋白
2	+	++++	++++	+
1	++	+++	+++	++
0.5	+++	++	++	+++
0	++++	+	+	++++

表1培養(yǎng)48h細胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達量情況（注：“+”的數(shù)量表示相對值的大小）
①

 

；
②

 

．
（4）表1結(jié)果說明SW可以誘發(fā)細胞

 

，從分子水平上分析，SW可以導(dǎo)致癌細胞內(nèi)

 

的合成量增加，該基因表達的過程可以表示為

 

．

Answer 1

考點：動物體細胞克隆

專題：

分析：分析表格：隨著SW濃度的增加，癌變的細胞減少，凋亡的細胞增多，可以得出SW可以誘導(dǎo)細胞凋亡；同時，可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加，Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少．
分析曲線圖：SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強；SW作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強．

解答： 解：（1）動物細胞培養(yǎng)，制成單個細胞，防止接觸抑制，給予適宜的環(huán)境，使細胞克�。�細胞分裂、細胞增殖），為科研提供足夠的材料．
（2）空白對照，不加SW，多組測量為減小誤差使實驗結(jié)果更可信．
（3）相同作用時間，不同SW濃度對小鼠肝癌Hepal-6細胞有抑制，且隨著SW濃度增加，抑制作用增強；同一SW濃度，不同作用時間對對小鼠肝癌Hepal-6細胞有抑制，且隨著SW作用時間增加，抑制作用增強．
（4）分析曲線圖可知：SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強；SW作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強．Bax基因表達的過程可以表示為Bax基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA，mRNA翻譯成Bax蛋白，如圖：．
故答案：（1）細胞克�。�細胞分裂、細胞增殖）
（2）不加SW藥物（或只加入等量的生理鹽水）  減小誤差使實驗結(jié)果更可信
（3）①SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強
②SW作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強
（4）凋亡    Bax蛋白

點評：本題結(jié)合圖表，考查動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆，意在考查考生具有對一些生物學(xué)問題進行初步探究的能力，具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理．