Question

13．長(zhǎng)木蜂有在蜂巢內(nèi)儲(chǔ)存蜂糧（主要是長(zhǎng)木蜂咀嚼過(guò)的花粉）的習(xí)性，其儲(chǔ)存的蜂糧在蜂室中能長(zhǎng)期保存不變質(zhì)．研究人員為篩選出蜂糧中具有抑菌作用的微生物，幵展實(shí)驗(yàn)如下：
（1）配置培養(yǎng)基．稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，再加入瓊脂和適量的水，配置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中可提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨．另配置適于乳酸菌生長(zhǎng)的MRS培養(yǎng)基．
（2）系列稀釋操作．將一批盛有9mL水的試管作滅菌處理；從三個(gè)蜂巢采集蜂糧各lg，分別加入含有9mL水的試管中混勻，可將移液管上的橡皮頭按壓三次（多次）（洗耳球）；移液管不能重復(fù)使用的原因除了需要避免混合上一個(gè)稀釋濃度的殘留液會(huì)使稀釋不準(zhǔn)確外，還有原因是不同蜂巢中的微生物可能不同．
（3）涂布、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)．將各稀釋濃度的試管，分別吸取0．lmL，在兩種培養(yǎng)基上涂布均勻，并在適宜條件下培養(yǎng)．根據(jù)菌落的大小、顏色、厚度、邊緣性狀、粗糙或濕潤(rùn)、能否治�。ㄖ辽賹懗鋈�項(xiàng)）等特征初步判斷微生物的種類．若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上最多發(fā)現(xiàn)有51種微生物生長(zhǎng)，在MRS培養(yǎng)基上最多有17種微生物生長(zhǎng)，則實(shí)際蜂糧中的微生物種類可
能（填“可能”或“不可能”）大于68種．
（4）篩選具有抑菌作用的微生物．用接種針挑取一種微生物的菌落，分別接種到富含青霉菌（A組）、枯草芽孢桿菌（B組）、啤酒酵母（C組）的培養(yǎng)基中，每組選取一個(gè)平板接種三個(gè)位點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖．其中作為對(duì)照的是A1、B1、C1組；分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)該微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用．
2、菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形狀、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的顏色、（5）菌落的透明度．

解答 解：（1）分析題意可知，實(shí)驗(yàn)需要篩選出蜂糧中具有抑菌作用的微生物，因此培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基需要加入瓊脂作為凝固劑；配置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中牛肉膏、蛋白胨可以提供碳源．
（2）微生物的分離與培養(yǎng)過(guò)程，關(guān)鍵是防止雜菌的污染，因此盛有9mL水的試管需要滅菌處理；稀釋培養(yǎng)液時(shí)，可將移液管上的橡皮頭按壓三次（多次）；移液管不能重復(fù)使用的原因除了需要避免混合上一個(gè)稀釋濃度的殘留液會(huì)使稀釋不準(zhǔn)確外，不同蜂巢中的微生物也可能不同．
（3）菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形狀、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的顏色、（5）菌落的透明度．若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上最多發(fā)現(xiàn)有51種微生物生長(zhǎng)，這51種微生物為需氧型微生物；而MRS培養(yǎng)基適于乳酸菌生長(zhǎng)的，即該培養(yǎng)基篩選的微生物為厭氧型微生物，因此實(shí)際蜂糧中的微生物種類 可能大于68種．
（4）根據(jù)題意可知，“每組選取一個(gè)平板接種三個(gè)位點(diǎn)”，則接種的為實(shí)驗(yàn)組，其余為對(duì)照組，即作為對(duì)照的是A1、B1、C1組；分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，A2培養(yǎng)基中菌落數(shù)最少，因此對(duì)該微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．
故答案為：
（1）瓊脂      牛肉膏、蛋白胨
（2）滅菌    按壓三次（多次）       不同蜂巢中的微生物可能不同
（3）大小、顏色、厚度、邊緣性狀、粗糙或濕潤(rùn)、能否治病       可能
（4）A1、B1、C1     青霉菌

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記菌落的概念和特征，識(shí)記培養(yǎng)基的成分，掌握篩選微生物的操作流程，再結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題．