Question

【題目】閱讀相關(guān)信息，完成微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用。

（1）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。回答下列問題：

①M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有___________（答出兩點即可）。氮源進入細菌后，可參與合成的生物大分子有___________（答出兩點即可）。

②若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是___________，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理___________。

（2）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株�；卮饐栴}：

①在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以________________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。

②純化菌種時，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是______________。該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目_________，這是因為_________。

Answer 1

【答案】碳源、無機鹽 蛋白質(zhì)、核酸 碘液 淀粉遇碘顯藍色，產(chǎn)淀粉酶菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈 原油 選擇 稀釋涂布平板法 少 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察得到的只是一個菌落

【解析】

1.測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計數(shù)(或血細胞計數(shù)板計數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，通過計數(shù)菌落數(shù)目計算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計數(shù)時不能剔除死菌，采用第二種方法計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以第一種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目低。

2.選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能。

（1）①微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)有：碳源、氮源、水、無機鹽等。而馬鈴薯浸出液能為微生物生長提供多種營養(yǎng)物質(zhì)如氮源、碳源、無機鹽等。生物體內(nèi)的有機物中，蛋白質(zhì)主要由C、H、O、N組成，部分含有P、S；核酸由C、H、O、N、P組成；磷脂由C、H、O、N、P組成，因此，氮源進入細胞后，可以參與合成蛋白質(zhì)、核酸、磷脂等。

②淀粉遇碘液變藍色，能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可以分解細胞周圍的淀粉，存在透明圈，從而容易篩選出產(chǎn)淀粉酶的微生物，因此為了篩選出分解淀粉的微生物，可在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，然后加入碘液為顯色劑，接種土壤浸出液后進行培養(yǎng)，然后選擇有透明圈的菌落即可。

（2）①在篩選過程中，應(yīng)將從富含原油的地方獲得的土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基上只有能夠利用原油的微生物能夠生長，而其他的微生物被抑制生長，因此，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

②因為不僅要對目標菌進行純化，而且還有計數(shù)，因此需要采用稀釋涂布平板法進行接種。用該方法統(tǒng)計時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察得到的只是一個菌落，因此在計數(shù)菌落時，往往比實際數(shù)目偏小。