Question

【題目】基因工程的設計和操作中，啟動子是運載體的重要組成部分．如圖是一種克隆啟動子的辦法，請據(jù)圖分析回答：
（1）啟動子是識別和結合的部位．若要獲得啟動子的堿基序列不能依據(jù)基因表達產物推知，原因是 ．
（2）過程①、③分別使用的限制酶是 ．
（3）過程④的原理是 ， 需要用到的工具酶是 ．
（4）過程⑤中克隆的啟動子與外源基因連接時，根據(jù)設計引物a．

Answer 1

【答案】
（1）RNA聚合酶；基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄
（2）BamHⅠHindⅢ
（3）DNA雙鏈復制；Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶
（4）外源基因的核苷酸序列
【解析】解：（1）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位．基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄，因此要獲得啟動子的堿基序列不能依據(jù)基因表達產物推知．（2）根據(jù)過程①后的結果可知，該過程使用的限制酶是BamHⅠ；根據(jù)過程③的結果可知，該過程使用的限制酶是HindⅢ．（3）過程④采用PCR技術進行擴增，其原理是DNA雙鏈復制；PCR操作是在較高溫度下進行的，因此需要用到的工具酶是Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶．（4）PCR技術的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．因此，過程⑤中克隆的啟動子與外源基因連接時，根據(jù)外源基因的核苷酸序列設計引物a．

所以答案是：（1）RNA聚合酶 基因中啟動子的堿基序列不能被轉錄 （2）BamHⅠHindⅢ（3）DNA雙鏈復制 Taq酶等熱穩(wěn)定聚合酶（4）外源基因的核苷酸序列

【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術才能正確解答此題．