Question

螢火蟲(chóng)發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象．如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)，也可使植物體發(fā)光．一直以來(lái)熒光素酶的惟一來(lái)源是從螢光蟲(chóng)腹部提�。�但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過(guò)轉(zhuǎn)基因工程實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶．請(qǐng)你根據(jù)已有的知識(shí)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
（1）熒光素酶基因是此轉(zhuǎn)基因工程中的

 

．
（2）將目的基因?qū)�入大腸桿菌體內(nèi)需要載體的幫助，下列各項(xiàng)是選取載體時(shí)必須考慮的是

 

A、能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存     B、具有多種特定的限制酶切割位點(diǎn)
C、具有與目的基因相同的堿基片段       D、具有某些標(biāo)記基因
（3）本實(shí)驗(yàn)中將目的基因?qū)�入大腸桿菌的載體可以是

 

A、質(zhì)粒       B、動(dòng)物病毒      C、噬菌體      D、植物病毒
（4）在此基因工程中，將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)，并使其在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為

 

．最常用的方法是首先用

 

處理大腸桿菌，目的是

 

．
（5）目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，用

 

技術(shù)來(lái)檢測(cè)．目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，除了通過(guò)大腸桿菌是否發(fā)光來(lái)進(jìn)行個(gè)體水平檢測(cè)外，還可以通過(guò)

 

來(lái)進(jìn)行分子水平的檢測(cè)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）熒光素酶基因是此轉(zhuǎn)基因工程中的目的基因．
（2）作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)．
（3）A、質(zhì)�？梢宰鳛槟康幕�因?qū)�入大腸桿菌的載體，A正確；
B、動(dòng)物病毒只能侵染動(dòng)物細(xì)胞，不能作為目的基因?qū)�入大腸桿菌的載體，B錯(cuò)誤；
C、噬菌體能侵染細(xì)菌，因此噬菌體能作為目的基因?qū)�入大腸桿菌的載體，C正確；
D、植物病毒只能侵染植物細(xì)胞，不能作為目的基因?qū)�入大腸桿菌的載體，D錯(cuò)誤．
故選：AC．
（4）在此基因工程中，將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)，并使其在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca²⁺處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于能夠吸收周?chē)鶧NA分子的感受態(tài)．
（5）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用DNA分子雜交技術(shù)．檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可以采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）目的基因
（2）ABD
（3）AC
（4）轉(zhuǎn)化    Ca²⁺     使大腸桿菌處于感受態(tài)（能夠吸收周?chē)鶧NA分子的狀態(tài)）
（5）DNA分子雜交     抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的只是準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．