Question

1．科研人員以抗四環(huán)素基因為標記基因，通過基因工程的方法讓大腸桿菌生產(chǎn)鼠的β-珠蛋白，治療鼠的鐮刀型細胞貧血癥．下列相關(guān)實驗設(shè)計中，不合理的是（　　）

• A． 用編碼序列加啟動子、抗四環(huán)素基因等元件來構(gòu)建表達載體
• B． 利用小鼠DNA分子通過PCR克隆出β-珠蛋白基因的編碼序列
• C． 用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出已經(jīng)導(dǎo)入β-珠蛋白編碼序列的大腸桿菌
• D． 用Ca²⁺處理大腸桿菌后，將表達載體導(dǎo)入具有四環(huán)素抗性的大腸桿菌中

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因表達載體的組成包括啟動子、目的基因、標記基因和終止子等，因此用編碼序列加啟動子、抗四環(huán)素基因等元件來構(gòu)建表達載體，A正確；
B、利用小鼠DNA分子通過PCR克隆出β-珠蛋白基因的編碼序列，B正確；
C、標記基因的作用是篩選含有目的基因的受體細胞，因此用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出已經(jīng)導(dǎo)入β-珠蛋白編碼序列的大腸桿菌，C正確；
D、目的基因是四環(huán)素抗性基因，受體細胞不能含有抗性基因，因此用Ca²⁺處理大腸桿菌后，將表達載體導(dǎo)入不具有四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各選項．