Question

【題目】某種植物甲能抗真菌病，其抗性是由細(xì)胞內(nèi)的幾丁質(zhì)酶基因A決定的。利用基因程將甲的A基因轉(zhuǎn)移到乙植物體內(nèi)，可提高乙抗真菌病的能力。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）在獲取目的基因時(shí)，可從甲的細(xì)胞中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，然后合成cDNA。利用mRNA合成cDNA的過(guò)程稱(chēng)作________；與甲細(xì)胞中的A基因相比，利用mRNA合成的cDNA中不具有________等核苷酸序列。

（2）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T—DNA中，原因是________：將目的基因插入到T—DNA中用到的工具酶有________。

（3）在獲得轉(zhuǎn)基因植物乙后，可利用基因探針來(lái)檢測(cè)乙的細(xì)胞中是否存在A基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物�；�因探針指的是________，

（4）實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將攜帶了A基因的乙植株體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，會(huì)獲得具有抗真菌病能力的完整植株。上述離體培養(yǎng)過(guò)程稱(chēng)為________。植物細(xì)胞發(fā)育成完整植株的潛能稱(chēng)作________，其原因是________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 啟動(dòng)子、內(nèi)含子、終止子 T—DNA可轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中，并能整合到染色體單鏈DNA上 限制酶和DNA連接酶 用放射性同位素標(biāo)記的含A基因的單鏈DNA片段 （植物）組織培養(yǎng) 細(xì)胞的全能性 分化后的植物細(xì)胞中具有形成完整植株的全部基因

【解析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��； ②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

（1）根據(jù)題意分析，上述人工合成cDNA的過(guò)程是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程，為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；與A基因相比，人工合成的cDNA中不含啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子。

（2）農(nóng)桿菌細(xì)胞中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA（可轉(zhuǎn)移DNA）能進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體DNA上，因此在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)基因時(shí)，需將目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA中，基因表達(dá)載體的構(gòu)建常需要使用限制酶和DNA連接酶。

（3）為了檢測(cè)乙的細(xì)胞中是否存在A基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，可使用放射性標(biāo)記的含A基因的單鏈DNA片段做基因探針。

（4）將攜帶了A基因的乙植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)成完整的植株的過(guò)程為植物組織培養(yǎng)，利用了植物細(xì)胞的全能性，依據(jù)的原理的是分化后的植物細(xì)胞中具有形成完整植株的全部基因。