Question

回答下列有關(guān)基因工程的問題（7分）

細(xì)菌、真菌等微生物產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶是一種耐熱纖維素酶，可分解自然界中的纖維素獲得能源�，F(xiàn)可通過基因工程將β-葡萄糖苷酶基因（bglB基因）與圖28的質(zhì)粒重組并導(dǎo)入大腸桿菌獲得大量有活性的β-葡萄糖苷酶。（質(zhì)粒中ori為質(zhì)粒復(fù)制所必需的DNA序列，啟動(dòng)子是使轉(zhuǎn)錄開始的一段DNA序列，終止子是提供轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列，抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，其余為不同限制酶的酶切位點(diǎn)，切割形成的黏性末端均不相同）

（1）．從高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的黑曲霉品種中提取到相應(yīng)的RNA，進(jìn)而獲得bglB基因的DNA序列，這種獲取目的基因的方法是____________________。

（2）．為避免自身環(huán)化并確保bglB基因與圖一質(zhì)粒準(zhǔn)確重組，可選用的限制酶是（ ）（2分）

A NdeI和XbaI B NdeI和BamHI

C XbaI D PstI E BamHI

（3）．bglB基因通過 酶與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒。

（4）．圖二培養(yǎng)基中含有剛果紅和纖維素，可用于篩選纖維素酶產(chǎn)量高的重組菌，原理如圖三。

據(jù)此分析，圖二中的[ ]菌落即為纖維素酶產(chǎn)量最高的菌株。

（5）．在PCR擴(kuò)增bglB基因的過程中，加入誘變劑可提高基因的突變率。與用誘變劑直接處理微生物相比，上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的bglB基因的效率更高，其原因是在PCR過程中（ ）（多選，2分）

A．僅針對(duì)bglB基因進(jìn)行誘變

B．bglB基因產(chǎn)生了定向突變

C．bglB基因可快速累積突變

D．bglB基因突變不會(huì)導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變

Answer 1

（1）、通過化學(xué)方法人工合成

（2）、B

（3）、DNA連接酶

（4）、C

（5）、C

【解析】

試題分析：

（1）.由提取出的RNA獲得DNA的方法是逆轉(zhuǎn)錄法，屬于人工合成目的基因的方法。

（2）.觀察題圖，目的基因插入質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)該插入啟動(dòng)子和終止子之間，啟動(dòng)子與終止子之間共有三個(gè)限制酶切點(diǎn)：NdeI、XbaI、BamHI，由于質(zhì)粒中XbaI的切點(diǎn)有兩個(gè)，因此不能用XbaI進(jìn)行切割，如果只用一種限制酶進(jìn)行切割，由于兩端的黏性末端相同，形成的重組DNA分子有多種，因此應(yīng)用兩種限制酶進(jìn)行切割，故用NdeI和BamHI進(jìn)行切割。

（3）.把目的基因與質(zhì)粒連接起來的酶是DNA連接酶。

（4）.分析圖二和圖三，可以推知，菌株的纖維素酶產(chǎn)量越高，分解的纖維素越多，菌落周圍的透明圈越大，比較四個(gè)選項(xiàng)，C菌落纖維素酶產(chǎn)量最高。

（5）PCR技術(shù)與微生物培養(yǎng)過程相比，PCR技術(shù)過程中DNA的復(fù)制速率更快，因此獲得熱穩(wěn)定性高的bglB基因的效率更高，故C正確。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。