Question

如圖為科學(xué)家通過(guò)基因工程方法培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的大致過(guò)程．請(qǐng)據(jù)圖分析回答：
（1）圖中①過(guò)程需要的酶有

 

、

 

．圖中A的組成，除了目的基因外，還必須有

 

和復(fù)制原點(diǎn)．
（2）將目的基因?qū)�人Ti質(zhì)粒上的

 

，而獲得重組質(zhì)粒；再將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)  桿菌時(shí)，可以用

 

處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)人．
（3）將目的基因?qū)�人植物�?xì)胞，除采用上圖所示的方法外，還可采用基因槍法和

 

．目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)的關(guān)鍵是其是否插入到植物細(xì)胞中

 

上．若插入成功，欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常采用的檢測(cè)方法是

 

．
（4）圖中③過(guò)程常采用的生物技術(shù)是

 

，其原理是

 

．
（5）生產(chǎn)實(shí)踐中種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉時(shí)，需要在行間種植一些

 

棉花以減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速率．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：分析圖解：圖中①過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程中需要利用限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體三種工具；過(guò)程②表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，此處利用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；過(guò)程③表示利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將重組細(xì)胞培養(yǎng)為轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉．
基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)．
目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法．
目的基因分子水平上的檢測(cè)的方法：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)

解答： 解：（1）圖中①過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程首先需要限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因，然后用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒．圖中A表示基因表達(dá)載體，其組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)．
（2）將目的基因?qū)�人Ti質(zhì)粒上的T-DNA，而獲得重組質(zhì)粒；再將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌，從而改變農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)人．
（3）將目的基因?qū)�人植物�?xì)胞，除采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法外，還可采用基因槍法和花粉管通道法．目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)的關(guān)鍵是其是否插入到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．若插入成功，欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常采用的檢測(cè)方法是抗原-抗體雜交．
（4）將植物受體細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株常采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理為細(xì)胞核的全能性．
（5）生產(chǎn)實(shí)踐中種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉時(shí)，需要在行間種植一些普通的非轉(zhuǎn)基因棉花以減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速率．
故答案為：
（1）限制酶     DNA連接酶    啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因
（2）T-DNA   Ca²⁺
（3）花粉管通道法    染色體的DNA   抗原-抗體雜交
（4）植物組織培養(yǎng)   植物細(xì)胞的全能性
（5）普通的非轉(zhuǎn)基因

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求考生掌握基因工程常用的三種工具及作用；識(shí)記基因工程的操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的原理及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．