2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家.綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況,幫助推斷蛋白質(zhì)的功能.如圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖,據(jù)圖回答:
注:圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒,需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒.限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G
↓GATCC-,限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是-
↓GATC-.在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點,在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點.
(1)在DNA連接酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來?并說出理由:
(2)過程③將重組質(zhì)粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多的方法是
.
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是
.獲得的轉基因克隆豬,可以通過對抗原表達基因的改造從而解決的醫(yī)學難題是:可以避免
.
(4)目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白,黃色熒光蛋白等,采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是:
(用數(shù)字表示).
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列 ②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成) ④表達出藍色熒光蛋白.