Question

3．農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤．為修復(fù)被污染的土壤，可按圖1程序選育出能降解該除草劑的細(xì)菌．已知該除草劑（含氮有機(jī)物）在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明．

（1）微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是無菌操作，應(yīng)該在酒精燈火焰旁完成．圖中B、C所示的接種方法是平板劃線法目的是將聚集的菌種逐步分離經(jīng)培養(yǎng)，在劃線的末端出現(xiàn)單個菌落，表明菌已分離．對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置．
（2）在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上．從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大�。畬嶒灲Y(jié)果如圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．
（3）若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是稀釋涂布平板法．對分離的細(xì)菌數(shù)目統(tǒng)計時，統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少．
（4）實驗結(jié)束后實驗材料及用具需要滅菌，實驗操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和消毒．

Answer 1

分析 1、消毒和滅菌：

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

2、分析題圖：該實驗是從土壤中篩選分離能降解除草劑的微生物的過程．該實驗要將土壤稀釋處理，以除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選土壤微生物，以菌落計數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計計數(shù)．

解答 解：（1）微生物接種技術(shù)的核心是無菌操作，應(yīng)該在酒精燈火焰旁完成．圖中B、C表示平板劃線法對微生物進(jìn)行接種，目的是將聚集的菌種逐步分離．經(jīng)培養(yǎng)，在劃線的末端出現(xiàn)單個菌落，表明菌已分離．對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置，以防止冷凝水污染培養(yǎng)基．
（2）要選育出能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上．從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大小，透明圈越大，說明其中的細(xì)菌降解除草劑的能量越強(qiáng)，因此圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．
（3）若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù)，可采用稀釋涂布平板法．用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計數(shù)時，由于所產(chǎn)生的菌落可能是由兩個或多個細(xì)胞形成的，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏低．
（4）實驗結(jié)束后實驗材料及用具需要滅菌，以防止污染環(huán)境，實驗操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和消毒．
故答案為：
（1）無菌操作      酒精燈火焰       平板劃線法    分離    單個菌落    高壓蒸汽滅菌    倒置     
（2）該除草劑      選擇培養(yǎng)基    E
（3）稀釋涂布平板法     少
（4）滅菌          消毒

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術(shù)，掌握消毒和滅菌的區(qū)別；識記接種微生物常用的方法，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．