Question

【題目】人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盤的滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，可通過孕婦血液循環(huán)而隨尿排出，利用HCG單克隆抗體診斷是否妊娠的靈敏度很高，回答下列問題:

(1)在人體內，糖蛋白可分布在體液、_____________等處，其中后者的糖蛋白具有______________ (至少答兩點)作用。

(2)動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同，利用了_______________。動物細胞融合可利用滅活的病毒，滅活是指_____________。

(3)在制備單克隆抗體過程中獲得雜交瘤細胞其目的是解決_____________等問題。從雜交瘤細胞中篩選獲得足夠數量能分泌所需抗體的細胞需要進行______________。

(4)在體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，需要控制其培養(yǎng)條件，若采用無血清培養(yǎng)，則需要在基本培養(yǎng)基中添加___________。

Answer 1

【答案】細胞膜 潤滑、識別（任答兩點） 細胞膜的流動性 用物理或化學手段使病毒失去感染能力 淋巴細胞不能無限增殖、小鼠骨髓瘤細胞不能產生抗體 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測 一些已知的促進細胞生長和增殖的物質

【解析】

效應B淋巴細胞可產生單一抗體，但不能無限增殖，小鼠骨髓瘤細胞可無限增殖，通過動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術可生產單克隆抗體。

(1)在人體內，細胞膜的外表面存在糖蛋白，該部分糖蛋白可參與細胞間信息分子的識別，消化道、呼吸道表面的糖蛋白具有潤滑、保護作用。

(2)動物細胞融合與植物原生質體融合均依賴于細胞膜的流動性。滅活病毒是用物理或化學手段使病毒失去感染能力，但保留其抗原特性，使之可以介導細胞融合，但不會裂解細胞。

(3) 效應B淋巴細胞不能無限增殖、小鼠骨髓瘤細胞不能產生抗體，通過動物細胞融合獲得的雜交瘤細胞具備二者優(yōu)點，既能無限增殖，又可以產生單一抗體。獲得足夠數量能分泌所需抗體的雜交瘤細胞，需要對雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

(4)血清中存在促進細胞生長和增殖的物質，在體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，若采用無血清培養(yǎng)，則需要在基本培養(yǎng)基中添加一些已知的促進細胞生長和增殖的物質。

項目	第一次篩選	第二次篩選
篩選 原因	誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經過選擇性培養(yǎng)
篩選 方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經多次篩選得到能產生特異性抗體的細胞群
篩選 目的	得到雜交瘤細胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞