Question

【題目】下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，下圖甲是某種基因表達(dá)載體及限制酶切割位點(diǎn)示意圖，圖乙是利用圖甲所示的基因表達(dá)載體獲得的含目的基因的表達(dá)載體。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

（1）基因工程操作過程中，能作為載體的除質(zhì)粒外，還包括_____________。質(zhì)粒作為基因工程的載體，應(yīng)具備的基本條件有________________________________________________（答兩點(diǎn)）。

（2）某DNA片段經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因，能與圖甲基因表達(dá)載體被__________（填“EcoRⅠ”或“Sau3AⅠ”）酶切割后的產(chǎn)物連接，原因是____________________________________________________。

（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要限制酶和_____________等工具酶。圖乙所示的表達(dá)載體能否在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物，并說明原因。____________________________________________________。

Answer 1

【答案】 噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒 能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn) Sau3AⅠ 這兩種酶切割后產(chǎn)生的DNA片段具有相同的黏性末端 DNA連接酶 不能；圖乙中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，目的基因不能轉(zhuǎn)錄

【解析】試題分析：本題考查基因工程，考查對(duì)基因工程工具和基因表達(dá)載體的理解和識(shí)記。解答此類題目，應(yīng)觀察、判斷限制酶的識(shí)別序列，明確基因表達(dá)載體的四部分構(gòu)成。

（1）基因工程操作過程中，能作為載體的除質(zhì)粒外，還包括噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。質(zhì)粒作為基因工程的載體，應(yīng)能夠自我復(fù)制，使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存；具有標(biāo)記基因，以便于目的基因的檢測(cè)與鑒定；具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便插入目的基因。

（2）BamHⅠ和Sau3AⅠ切割DNA后得到相同的黏性末端，可以通過堿基互補(bǔ)配對(duì)連接。

（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要限制酶和DNA連接酶等工具酶。圖乙中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，目的基因不能轉(zhuǎn)錄，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物。