Question

16．圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為：C↓CGG、G↓GATCC．↓GATC．CCC↓GGG．下列分析中正確的是（　　）

• A． 若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵
• B． 若圖1所示DNA虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A替換，用限制酶SmaⅠ完全切割后會(huì)產(chǎn)生3種不同的DNA片段
• C． 若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D應(yīng)選擇限制酶 BamHⅠ和MboⅠ
• D． 若用上一選項(xiàng)中的條件構(gòu)建含有目的基因D的重組質(zhì)粒并成功導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi)，則此細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基中不能存活

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖1中：DNA片段含有2個(gè)限制酶MspⅠ切割位點(diǎn)，可被限制酶MspⅠ切割產(chǎn)生長度為534+2=536bp、796-2-2=792bp、658+2=660bp的三中DNA片段．基因D兩側(cè)序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
圖2中：質(zhì)粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答 解：A、由于限制酶MspⅠ識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)為C↓CGG，在圖1DNA片段中有2個(gè)，因而若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；
B、若圖1所示DNA虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A替換后，該段堿基序列不能被限制酶SmaⅠ識(shí)別，所以用限制酶SmaⅠ完全切割后只會(huì)產(chǎn)生2種不同的DNA片段，B錯(cuò)誤；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因D上，若用這兩種酶切割會(huì)被破壞目的基因D；運(yùn)載體的兩個(gè)標(biāo)記基因上都有限制酶MboⅠ的切割位點(diǎn)，用該酶切割會(huì)破壞這兩個(gè)標(biāo)記基因，因此只能選用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和運(yùn)載體，C錯(cuò)誤；
D、若用上述條件構(gòu)建含有目的基因D的重組質(zhì)粒并成功導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi)，由于破壞了抗生素A抗性基因，所以此細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基中不能存活，D正確．
故選：D．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程操作的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力．