Question

【題目】人血清白蛋白（HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白（HSA)的流程。回答下列問題：

（1）為了在短時間內(nèi)獲得大量HSA基因，可以采用___________技術。

（2）過程①常用__________法。在過程②進行之前，需對早期胚胎進行性別鑒定，可取胚胎細胞進行DNA分析，其采用的基因探針來自__________(填“常”或“性”)染色體。

（3）為了使HSA基因只在轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺細胞中表達，則構(gòu)建基因表達載體時需要借助DNA連接酶在HSA基因前接上________________。

（4）檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用________技術。

Answer 1

【答案】 PCR 顯微注射 性 乳腺蛋白基因的啟動子 抗原一抗體雜交

【解析】試題分析：根據(jù)基因工程技術的基本步驟：目的基因的獲取（方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成）→基因表達載體的構(gòu)建（基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等）→將目的基因?qū)�入受體細胞（將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法）→目的基因的檢測與鑒定（分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等）。據(jù)此分析題圖可知，操作①為將目的基因——HSA基因?qū)�入受精卵�?nèi)的過程，方法是顯微注射法；操作②是對轉(zhuǎn)基因受精卵培育至早期胚胎并移植到代孕奶牛子宮內(nèi)。

（1）PCR技術可以在短時間內(nèi)大量擴增目的基因，所以要在短時間內(nèi)獲得大量HSA基因，可以采用PCR技術。

（2）結(jié)合前面的分析可知，圖中操作①是將目的基因?qū)�入動物細�?/span>，最有效的方法是顯微注射法；在過程②進行之前，需對早期胚胎進行性別鑒定，可取胚胎細胞進行DNA分析，其采用的基因探針來自性染色體。

（3）為了使HSA基因只在轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺細胞中表達，則構(gòu)建基因表達載體時需要借助DNA連接酶在HSA基因前接上乳腺蛋白基因的啟動子。

（4）檢測目的基因是否表達產(chǎn)生相應的蛋白質(zhì)，可將表達產(chǎn)生的蛋白質(zhì)看做抗原，用特定的抗體進行檢測，若出現(xiàn)抗原-抗體的特異性結(jié)合反應，則說明目的基因已經(jīng)成功表達，反之，則沒有表達；所以采用檢測技術稱為抗原-抗體雜交技術。