Question

如圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：

（1）若限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識別下列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，那么在①過程中，應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶

 

（Ⅰ/Ⅱ）切割質(zhì)粒，得到的粘性末端為

 

．用限制性核酸內(nèi)切酶

 

（Ⅰ/Ⅱ）切割抗蟲基因．①過程在

 

（體內(nèi)/體外）進(jìn)行．
（2）將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有

 

的培養(yǎng)基上，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入，該培養(yǎng)基的目的是

 

．
（3）經(jīng)篩選分析，該植株細(xì)胞中含有一個(gè)攜帶抗蟲基因的DNA片段，因此可以把它看作是

 

．理論上，該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F₁代中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的

 

．
（4）⑤過程所用技術(shù)稱為

 

，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：結(jié)合題意分析圖解：圖中目的基因的左右兩側(cè)分別有限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的識別序列；并且質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因上有限制酶Ⅰ的識別序列，氨芐青霉素抗性基因上具有限制酶Ⅱ的識別序列．并且兩種識別序列的末端是相同的．
圖中過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示目的基因?qū)�入大腸桿菌，③表示目的基因?qū)�入土壤農(nóng)桿菌，④表示目的基因?qū)�入植物的根�?xì)胞，⑤表示通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得完成植株．

解答： 解：（1）質(zhì)粒中兩個(gè)標(biāo)記基因中均有限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，若用該酶切，抗性基因均被破壞，因此用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒切割形成的黏性末端為；目的基因可以用限制酶Ⅰ或兩種酶一起切割，由于兩種切割形成的末端序列相同，因此可以連接．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在生物體外完成的．
（2）用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒，破壞了質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因，因此標(biāo)記基因是四環(huán)素抗性基因，所以應(yīng)有含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上，用于篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞．
（3）該植株細(xì)胞中含有一個(gè)攜帶抗蟲基因的DNA片段，并表現(xiàn)出抗蟲性狀，因此可以把它看作是雜合子理論上，這個(gè)雜合子的基因可表示為Aa，Aa自交后代中，含A_的概率為

3

4

．
（4）根據(jù)細(xì)胞的全能型（含有發(fā)育成完整個(gè)體的全部遺傳物質(zhì)），將以分化的根細(xì)胞培養(yǎng)成一棵植株，運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）ⅡⅠ（Ⅰ和Ⅱ）   體外
（2）四環(huán)素  篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞
（3）雜合子   

3

4

（4）植物組織培養(yǎng)  發(fā)育成完整個(gè)體的全部遺傳物質(zhì)

點(diǎn)評：本題具有一定的綜合性，難度適中，考查了基因表達(dá)載體的構(gòu)建、限制酶的作用特點(diǎn)、基因分離定律的應(yīng)用以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)等方面的知識，本題將多個(gè)知識點(diǎn)有機(jī)整合，既要求考生具有一定的識圖能力、分析能力、理解能力，又要求考生能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．