Question

【題目】生活飲用水的微生物安全性日常檢測是非常重要的。請回答下列問題：

（1）將己知體積的飲用水用____________過濾后，將其放在含有____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（2）為了探究溫度對大腸桿菌種群數(shù)量的影響。將適量大腸桿菌菌液與適量的無菌葡萄糖溶液混合均勻，取等量取適量接種到若干培養(yǎng)瓶中，隨機(jī)均分成幾組，并編號，現(xiàn)在在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)，并記錄，再將各組分別置于不同溫度的環(huán)境中培養(yǎng)兩周，每天同一時間取樣技計數(shù)，并記錄。統(tǒng)計分析實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)。

①請預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果（設(shè)計一個坐標(biāo)系，分別畫出大腸桿菌在最適溫度及高于、低于最適溫度時的種群數(shù)量變化趨勢曲線）

②在整個實(shí)驗(yàn)過程中，從靜置培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)樣液計數(shù)時應(yīng)注意______________________。培養(yǎng)后期樣液需用____________稀釋后再計數(shù)。將樣液稀釋103倍，采用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù) （計數(shù)室規(guī)格為2mm×2mm×0.1mm，共25個中格），所觀察到的計數(shù)室中大腸桿菌分布如下圖。若只以圖中5個中格的統(tǒng)計為例，則培養(yǎng)液中大腸桿菌數(shù)為____________個/mL。

Answer 1

【答案】 濾膜 伊紅美藍(lán) 不同溫度下大腸桿菌種群數(shù)量隨時間變化的趨勢圖 搖勻培養(yǎng)液后再取樣 無菌水 2.5×108

【解析】試題分析：酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況；利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細(xì)胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測定；探究酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)流程為：①酵母菌培養(yǎng)（液體培養(yǎng)基，無菌條件），②振蕩培養(yǎng)基（酵母菌均勻分布于培養(yǎng)基中），滴加培養(yǎng)液時，應(yīng)先加蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液，③觀察并計數(shù)→重復(fù)②、③步驟（每天計數(shù)酵母菌數(shù)量的時間要固定），④繪圖分析。

（1）伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基常用來鑒別大腸桿菌，其原理是大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)生大量的混合酸，菌體帶H+故菌落被染成深紫色（黑色），從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。因此將己知體積的飲用水用濾膜過濾后，將其放在含有伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，進(jìn)而鑒定和計算大腸桿菌的存在和數(shù)目。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是時間和溫度，因變量是大腸桿菌種群數(shù)量，因此橫坐標(biāo)是時間，縱坐標(biāo)是種群數(shù)量，不同的溫度用不同的曲線表示，溫度高于或等于最適宜溫度，種群數(shù)量增加都會變慢，如圖：

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（3）靜置培養(yǎng)瓶中大腸桿菌分布不均勻，因此從靜置培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)樣液計數(shù)時應(yīng)注意搖勻培養(yǎng)液后再取樣；培養(yǎng)后期大腸桿菌數(shù)量過高，不利于計數(shù)，因此應(yīng)該用無菌水稀釋后再計數(shù)；據(jù)圖分析，5個中格中大腸桿菌的平均數(shù)為4個，則25個中格中的大腸桿菌共100個，因此培養(yǎng)液中大腸桿菌數(shù)=100÷（2×2×0.1×10-3）×103=2.5×108個/mL。