Question

11．科研人員為了分離、篩選藍(lán)莓果酒專用酵母來改善藍(lán)霉果酒的品質(zhì)，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：
①取不同品種的成熟藍(lán)莓制果漿，置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵，直至產(chǎn)生大量氣泡和明顯酒味．
②將藍(lán)莓發(fā)酵液梯度稀釋后，進(jìn)行涂布平板操作，每個(gè)梯度3個(gè)平板，并在恒溫下培養(yǎng)2d，根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落．
③將挑取的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后，通過平板劃線法分離純化并保存．
④檢測篩選菌株的發(fā)酵性能，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果．

品  種	乙醇體積分?jǐn)?shù)/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注：“-”表示不產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)氣，“+”越多產(chǎn)氣越多．
分析回答：
（1）酵母細(xì)胞中能產(chǎn)生CO₂的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體．步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右，其主要目的是為酵母菌細(xì)胞生長、繁殖提供適宜的溫度．
（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無菌水進(jìn)行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．“一個(gè)菌落”在生態(tài)學(xué)中屬于一個(gè)種群．
（3）步驟③平板劃線時(shí)，每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進(jìn)行滅菌．
（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推知，BF-17（品種）是較理想的釀酒菌種．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；
（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)；在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）酵母細(xì)胞既能進(jìn)行有氧呼吸，也能進(jìn)行無氧呼吸，所以產(chǎn)生CO₂的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體．酵母菌生長的適宜溫度是18-25℃，所以步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右的目的是為酵母菌細(xì)胞生長、繁殖提供適宜的溫度．
（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無菌水進(jìn)行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．“一個(gè)菌落”在生態(tài)學(xué)中屬于一個(gè)種群．
（3）步驟③平板劃線時(shí)，每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進(jìn)行滅菌．
（4）根據(jù)題意和圖表分析可知：品種BF-17是較理想的釀酒菌種．
故答案為：
（1）細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體    為酵母菌細(xì)胞生長、繁殖提供適宜的溫度
（2）無菌水  單個(gè)細(xì)胞   種群
（3）灼燒
（4）BF-17

點(diǎn)評 本題考查果酒的制作的相關(guān)知識，要求考生識記參與果酒制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒制作的原理及操作條件，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．