Question

將PVY病毒外殼蛋白基因（PVY-CP）導(dǎo)人馬鈴薯，并使之表達(dá)即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯．圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，PVY-CP可以從質(zhì)粒A中獲取；質(zhì)粒B是選用的運(yùn)載體，另已知部分限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)：

BamH I	HindⅢ	BglII	Sma I
G↓GATCC CCTAG↑G	A↓ACCTT TTCGA↑A	A↓GATCT TCTAG↑A	CCC↓GGG GGG↑CCC

請(qǐng)結(jié)合圖象，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答問題：
（1）含有PVY-CP的質(zhì)粒A保存在某細(xì)菌群體中，各個(gè)細(xì)菌含有相關(guān)不同的基因，這樣的細(xì)菌群體稱為

 

．
（2）關(guān)于步驟②中Klenow酶的猜測(cè)，合理的是

 

．
A．催化合成的片段起引物作用       B．可以將DNA片段的粘性末端變成平末端
C．能催化DNA鏈的合成             D．與DNA連接酶的功能相同
（3）步驟④中應(yīng)該使用的限制酶是

 

．
（4）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行轉(zhuǎn)化，首先需要將質(zhì)粒C導(dǎo)人

 

中，進(jìn)而轉(zhuǎn)化馬鈴薯，然后通過

 

技術(shù)獲得抗PVY病毒馬鈴薯苗，最后進(jìn)行相關(guān)的鑒定．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，步驟①～③是從質(zhì)粒A中獲取目的基因（PVY-CP）的過程；質(zhì)粒B是選用的運(yùn)載體；④過程需要用限制酶處理質(zhì)粒B；⑤表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要DNA連接酶．

解答： 解：（1）將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各受體菌分別含有這種生物的不同的基因，這個(gè)受體菌群稱為基因文庫．
（2）由圖可知，步驟②中用Klenow酶處理后，黏性末端變成平末端，說明Klenow酶能催化DNA鏈的合成，從而將DNA片段的粘性末端變成平末端．故選：BC．
（3）經(jīng)過步驟③后，目的基因（PVY-CP）的一側(cè)是BamH I切割形成的黏性末端．目的基因（PVY-CP）的另一側(cè)是平末端，表中只有SmaⅠ切割后形成的是平末端．綜上可知，步驟④中應(yīng)該使用的限制酶是BamH I、SmaⅠ．
（4）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行轉(zhuǎn)化，首先需要將質(zhì)粒C導(dǎo)人農(nóng)桿菌中，再用農(nóng)桿菌感染馬鈴薯，進(jìn)而轉(zhuǎn)化馬鈴薯；將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成馬鈴薯植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）基因文庫（或部分基因文庫）
（2）BC
（3）BamH I、SmaⅠ
（4）農(nóng)桿菌植物組織培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖表，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能分析流程圖，從中獲取有效信息準(zhǔn)確判斷第（2）題；能分析表格，明確BglⅡ和BamHI切割后形成的黏性末端相同；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過程及應(yīng)用．