Question

19．最新研究表明，地球歷史上最悲劇的物種大滅絕事件可能是由細(xì)菌導(dǎo)致的．該物種大滅絕事件發(fā)生于2.52億年前二疊紀(jì)末期（在恐龍出現(xiàn)之前），無(wú)數(shù)物種由于無(wú)法及時(shí)適應(yīng)當(dāng)時(shí)氣候變化，而逐漸消失滅絕．與此同時(shí)，某種細(xì)菌A得到快速大量繁殖，原因有二：
第一，該細(xì)菌A能利用海洋沉積層的二氧化碳和氫氣合成并釋放甲烷，顯著改變氣候和海洋化學(xué)成分；
第二，火山噴發(fā)導(dǎo)致鎳元素迅速增多，這種至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)幫助微生物（細(xì)菌A）增殖．
（1）從生態(tài)系統(tǒng)成分的角度看，該細(xì)菌A屬于生產(chǎn)者．
（2）在進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)必須防止外來其他雜菌的干擾．為此，在接種前，除了必須對(duì)培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌外，還必須對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外；在接種操作時(shí)，必須在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作（在酒精燈火焰旁操作）、接種環(huán)放在火焰上灼燒并冷卻、試管口火焰灼燒滅菌．
（3）鑒于細(xì)菌A在高濃度有機(jī)廢水的生物處理中能發(fā)揮很大作用，要對(duì)其進(jìn)行篩選，則應(yīng)選用表中的C培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：

培養(yǎng)液	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4•7H2O	KCl	NiSO4
A	-	-	1g/L	1g/L	0.5 g/L	0.01g/L
B	3g/L	3g/L	1g/L	1g/L	0.5 g/L	0.01g/L
C	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5 g/L	0.01g/L

①A培養(yǎng)液缺少氮源，細(xì)菌不能很好生長(zhǎng)，②B培養(yǎng)液所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較齊全，不能篩選出細(xì)菌A．
（4）分離并觀察細(xì)菌A，可采用平板劃線法或涂布平板操作法將初篩菌液接種在配方適宜的固體培養(yǎng)基上．接種前，必須對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌．
（5）細(xì)菌A計(jì)數(shù)，可吸取菌液1ml稀釋1000倍，然后吸取稀釋后的菌液0.2ml，接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種所使用的工具是無(wú)菌涂布器．一段時(shí)間后觀察菌落并計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次結(jié)果如圖，則該菌液的濃度是40000個(gè)細(xì)菌/ml．

Answer 1

分析 解答本題需掌握：培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．
微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的滅菌方法：干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌等．
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則有單一變量原則和對(duì)照原則．

解答 解：（1）根據(jù)題意，該細(xì)菌A能利用海洋沉積層的二氧化碳和氫氣合成并釋放甲烷，故該生物為生產(chǎn)者．
（2）微生物培養(yǎng)時(shí)必須防止外來其他雜菌的干擾．在接種或倒平板操作時(shí)，必須在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作、在酒精燈火焰旁操作、接種環(huán)放在火焰上灼燒并冷卻、錐形瓶的瓶口火焰灼燒滅菌．
（3）細(xì)菌A在高濃度有機(jī)廢水的生物處理中能發(fā)揮很大作用，所以選擇培養(yǎng)該細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中不應(yīng)含有有機(jī)碳源，但必須提供氮源，故C正確；不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因是A培養(yǎng)液缺少氮源，細(xì)菌不能很好生長(zhǎng)；B培養(yǎng)液所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較齊全，但不能篩選出細(xì)菌A．
（4）分離細(xì)菌時(shí)，可以采用平板劃線法和稀釋涂布平板法；要想觀察細(xì)菌的菌落特征，所用培養(yǎng)基必須為固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．
（5）要想對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，必須采用稀釋涂布平板法，接種所用工具為無(wú)菌涂布器；分析題圖，三個(gè)培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)的菌落數(shù)目為（7+8+9）÷3=8（個(gè)/培養(yǎng)基），由于菌液稀釋倍數(shù)為1000倍，菌液的體積為0.2ml，因此該菌液的濃度=（7+8+9）÷3×1000÷0.2=40000（個(gè)細(xì)菌/ml）．
故答案為：
（1）生產(chǎn)者
（2）在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作（在酒精燈火焰旁操作）   接種環(huán)放在火焰上灼燒并冷卻   試管口火焰灼燒滅菌
（3）C  ①A培養(yǎng)液缺少氮源，細(xì)菌不能很好生長(zhǎng)    ②B培養(yǎng)液所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較齊全，不能篩選出細(xì)菌A
（4）平板劃線法或涂布平板操作   固體    高壓蒸汽滅菌
（5）無(wú)菌涂布器     40000

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分，掌握微生物培養(yǎng)和純化的接種方法，識(shí)記消毒和滅菌的有關(guān)方法，能夠利用對(duì)照實(shí)驗(yàn)的原則分析實(shí)驗(yàn)．