Question

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多，同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如右圖所示．請(qǐng)分析回答．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4.7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL
（1）此培養(yǎng)基

 

（能/不能）用于植物組織培養(yǎng)，理由是

 

．
（2）培養(yǎng)基中加人尿素的目的是

 

，這種培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的

 

和

 

，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是

 

．
（4）圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時(shí)，可采用

 

或

 

含尿素培養(yǎng)基接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．初步篩選出來(lái)的菌種還需要用生化的方法作進(jìn)一步的鑒定：在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入

 

指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成

 

色，則可準(zhǔn)確說(shuō)明該菌種能夠分解尿素．
（5）在實(shí)驗(yàn)中，下列材料或用具需要滅菌的是

 

，需要消毒的是

 

（填序號(hào)）．
①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿  ②玻棒、試管、錐形瓶和吸管  ③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手
（6）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有

 

（填序號(hào)）．
①土樣不同    ②培養(yǎng)基污染    ③操作失誤    ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照
（7）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行

 

處理后，才能倒掉．

Answer 1

考點(diǎn)：植物的組織培養(yǎng),微生物的分離和培養(yǎng)

專(zhuān)題：

分析：本題是對(duì)用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的差異、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、培養(yǎng)液中的成分、常用的接種方法等相關(guān)知識(shí)的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的差異、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、培養(yǎng)液中的成分、常用的接種方法的具體操作和目的，然后結(jié)合問(wèn)題進(jìn)行解答．

解答： 解（1）該培養(yǎng)基的成分中沒(méi)有植物激素，因此不能用于植物組織培養(yǎng)．
（2）該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌），不能分解尿素的細(xì)菌將因缺少氮源無(wú)法生長(zhǎng)繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）目的菌生長(zhǎng)繁殖需要的氮源來(lái)自尿素，碳源來(lái)自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需要微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．
（4）圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時(shí)，可采用平板劃線法或稀釋涂布法，在含尿素培養(yǎng)基接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．初步篩選出來(lái)的菌種還需要用生化的方法作進(jìn)一步的鑒定：在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚酞指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，則可準(zhǔn)確說(shuō)明該菌種能夠分解尿素產(chǎn)生了氨．
（5）在實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌處理，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手需要消毒處理．
（6）該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行無(wú)菌操作．
（7）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理，才能倒掉．
故答案為：
（1）不能  因?yàn)槿鄙僦参锛に兀ɑ蛉鄙僦参镄枰�的各種營(yíng)養(yǎng)）
（2）篩選目的菌  選擇
（3）尿素、葡萄糖  為目的菌提供氧氣
（4）平板劃線法   稀釋涂布法  酚酞  紅
（5）①②③
（6）①②③
（7）滅菌

點(diǎn)評(píng)：對(duì)于微生物培養(yǎng)技術(shù)、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、培養(yǎng)基為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的成分、常用的接種方法和具體操作過(guò)程的理解把握知識(shí)點(diǎn)間的內(nèi)在聯(lián)系是解題的關(guān)鍵．