Question

5．科學(xué)家設(shè)法將生長(zhǎng)激素基因?qū)�人其它生物體（細(xì)胞）內(nèi)，從而獲取大量的生長(zhǎng)激素，應(yīng)用于侏儒癥的早期治療，如圖所示．請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過程①采用的方法是逆轉(zhuǎn)錄，過程②之前需用同一種限制酶處理目的基因和質(zhì)粒．
（2）過程③需事先對(duì)大腸桿菌用Ca²⁺處理，使其處于感受態(tài)，接著將重組表達(dá)載體溶于緩沖液與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）過程④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中使用的工具酶是胰蛋白酶，與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需加入動(dòng)物血清．
（4）過程⑤一般先將生長(zhǎng)激素基因?qū)�人奶牛的受精卵，然后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行胚胎移植，生下轉(zhuǎn)基因牛犢．

Answer 1

分析 1、根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中過程①?gòu)娜梭w組織細(xì)胞中獲取人生長(zhǎng)激素mRNA，并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因，②表示利用DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，③④⑤表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．
2、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．

解答 解：（1）圖示過程①表示利用人的生長(zhǎng)激素mRNA獲得人生長(zhǎng)激素基因，此方法為反轉(zhuǎn)錄法．過程②表示構(gòu)建基因的表達(dá)載體，之前先要用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，獲得相同的粘性末端才能重建運(yùn)載體重組質(zhì)粒．
（2）過程③將目的基因?qū)�入的受體細(xì)胞為大腸桿菌，常采用Ca²⁺處理法，使其處于感受態(tài)，然后將重組表達(dá)載體溶于緩沖液與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化．
（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散成單個(gè)或從瓶壁上脫落下來；與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基不同，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中要加入動(dòng)物血清、血漿．
（4）利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物，需將生長(zhǎng)激素基因?qū)�入奶牛受精卵中，然后將轉(zhuǎn)基因受精卵進(jìn)行培養(yǎng)得到早期胚胎，再移植到代孕母牛體內(nèi)發(fā)育，出生后就是轉(zhuǎn)基因牛犢．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄   同一種限制酶   
（2）Ca²⁺ 將重組表達(dá)載體溶于緩沖液與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子
（3）胰蛋白酶 動(dòng)物血清 
（4）受精卵  早期胚胎培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟；識(shí)記細(xì)胞分化過程中基因選擇性表達(dá)，明確生長(zhǎng)激素基因只在垂體細(xì)胞中表達(dá)；識(shí)記并區(qū)分目的基因?qū)�入不同�?xì)胞的方法；明確目的基因和質(zhì)粒需要同種限制酶切割．