Question

8．已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖．將這兩種細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進(jìn)細(xì)胞融合，獲得雜種細(xì)胞，并生產(chǎn)單克隆抗體．請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用效應(yīng)B淋巴細(xì)胞，主要原因是B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖．
（2）①過(guò)程中，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇．
（3）②過(guò)程為細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便．．
（5）為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細(xì)胞，需在③過(guò)程向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，理由是雜交瘤細(xì)胞可利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖．

Answer 1

分析 1、分析題圖：①是誘導(dǎo)細(xì)胞融合，②利用特定選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)并篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，③用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，④是培養(yǎng)篩選出的雜交瘤細(xì)胞
2、單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖，故生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用一個(gè)B淋巴細(xì)胞．
（2））①誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇．
（3）②過(guò)程為細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其中通入CO₂的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便．
（5）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長(zhǎng)的細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞、融合的淋巴細(xì)胞、融合的骨髓瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞．人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖．
故答案為：
（1）B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖
（2）聚乙二醇
（3）細(xì)胞   維持培養(yǎng)液的pH
（4）腹腔  無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便
（5）氨基嘌呤    淋巴細(xì)胞中的S

點(diǎn)評(píng) 本題考查單克隆抗體的制備過(guò)程，意在考查考生分析題文中提取有效信息和得出正確結(jié)論的能力；識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，解決生物學(xué)問(wèn)題的能力．