Question

【題目】下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請回答有關問題：

（1）根據配方可知該培養(yǎng)基只允許分解_________的細菌生長,從功能上看,這種培養(yǎng)基被稱作_____培養(yǎng)基。為防止雜菌污染，對培養(yǎng)基采用的滅菌方法是______________。

（2）若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數來估計樣品中的細菌數，上述培養(yǎng)基中還需要添加__________，接種時應采用__________法。該方法接種培養(yǎng)后的菌落如下圖，其中適合用于計數的平板是________。

（3）某同學涂布平板時用0.lmL稀釋液,稀釋液的稀釋倍數為105,平板中測得菌落數分別為17、156、179、451、175,則每1mL樣品中的細菌數約是_______個。從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入_____________。

Answer 1

【答案】 尿素 選擇 高壓蒸汽滅菌 凝固劑（或瓊脂） 稀釋涂布平板法 C 1.7×l08 酚紅指示劑

【解析】分析：選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應的特殊營養(yǎng)物質或化學物質，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。稀釋涂布平板法計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內。經培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。

（1）該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細菌生長，故這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基會抑制其它種類微生物生長，其原因是該培養(yǎng)基以尿素為唯一的氮源，不能利用尿素的細菌不能在該培養(yǎng)基上生長。為防止雜菌污染，對培養(yǎng)基采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。

（2）若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數來估計樣品中的細菌數，需用固體培養(yǎng)基，故上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是瓊脂，接種時應采用稀釋涂布平板法法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，為了盡可能保證每個菌落是由一個細菌繁殖而來，所以適于計數的平板是C，因為菌落多，大小相對均勻。

（3）根據題意，用0.1mL稀釋液在稀釋倍數為105的平板中測得菌落數（取菌落數在30—300范圍內較為準確）的平均值為（156+179+175）/3=170，則每mL樣品中的細菌數=平板上菌落數的平均值÷體積×稀釋倍數=170÷0.1×105=1.7×108。由于細菌分解尿素的過程中產生了氨，氨使培養(yǎng)基的PH值升高，故從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變紅，可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素。