Question

【題目】大豆植株的DNA序列D能在基因A控制表達的轉(zhuǎn)移酶作用下，從序列原本所在染色體的某個位置轉(zhuǎn)移到其他位置，這種隨機轉(zhuǎn)移會導(dǎo)致突變。科研人員利用這一原理來構(gòu)建穩(wěn)定遺傳的大豆突變體庫，以獲得穩(wěn)定遺傳的優(yōu)良品種。

（1）科研人員分別將序列D和基因A作為_________，插入含卡那霉素抗性基因的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的_____上，利用轉(zhuǎn)化植物，篩選得到轉(zhuǎn)D植株和轉(zhuǎn)A植株。將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中時，可以用______處理細菌細胞以增加____________。

（2）將獲得的外植體置于合適培養(yǎng)基中進行篩選，發(fā)生轉(zhuǎn)化的外植體通過____________形成愈傷組織，再通過___________產(chǎn)生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。培養(yǎng)過程中，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，應(yīng)定期更換___________。

（3）若能夠在植物細胞中檢測到轉(zhuǎn)D和轉(zhuǎn)A基因，_________(填“能”或“不能”)說明該基因工程項目獲得成功�；�因轉(zhuǎn)化是否成功應(yīng)對大豆植物進行________水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。

Answer 1

【答案】 目的基因 T-DNA CaCl2 細胞壁的通透性 脫分化 再分化 培養(yǎng)液 不能 分子(或DNA)

【解析】分析題文描述可知：本題綜合考查學(xué)生對基因工程的基本操作程序、植物組織培養(yǎng)的過程，特別是將目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定等相關(guān)知識的識記和理解能力。

(1)依題意和圖示分析可知：序列D和基因A均為目的基因。在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物細胞之前，需將目的基因插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上，此時需用CaCl2或Ca2+處理，以增大土壤農(nóng)桿菌細胞壁的通透性，使其成為感受態(tài)細胞。

(2)置于合適培養(yǎng)基中進行篩選而獲得的發(fā)生轉(zhuǎn)化的外植體，需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能將其培育成植物體，其過程是：發(fā)生轉(zhuǎn)化的外植體通過脫分化形成愈傷組織，再通過再分化產(chǎn)生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便于清除代謝產(chǎn)物并防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成的危害。

(3) 若能夠在植物細胞中檢測到轉(zhuǎn)D和轉(zhuǎn)A基因，只能說明序列D和基因A成功導(dǎo)入并插入到受體細胞的DNA上，但不能說明序列D和基因A是否在受體細胞中成功表達，也就不能說明該基因工程項目獲得成功�；�因轉(zhuǎn)化是否成功應(yīng)對大豆植物進行分子(或DNA) 水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。