Question

11．某高校研發(fā)的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發(fā)的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預防效果，其有效成分是一種該菌表面抗原蛋白質(zhì)，請回答下列問題．
（1）根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進行人工合成，然后通過PCR技術大量擴增．
（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達載體，要利用DNA連接酶連接被限制酶切開的磷酸二酯鍵．
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．最終翻譯是否成功，常用的檢測方法是抗原-抗體雜交．
（4）實驗證明，一定時間內(nèi)間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續(xù)時間更久．

Answer 1

分析 1、獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取：②利用PCR技術擴增：③人工合成：這種方法有兩條途徑，一是以目的基因轉(zhuǎn)錄的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA，再在酶的作用下合成雙鏈DNA，即目的基因；另一條途徑是蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結(jié)構基因的核苷酸序列，然后用化學的方法以單核苷酸為原料合成．
2、基因表達載體的構建的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因
（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)．
（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構的DNA片段，位于基因的尾端．
（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素基因．
3、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程．

解答 解：（1）一種如人工合成法，根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結(jié)構基因的核苷酸序列，進行人工合成目的基因．在用PCR技術體外大量擴增．
（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，需要用限制酶將目的基因和運載體切割磷酸二酯鍵，再用DNA連接酶連接形成重組DNA．
（3）轉(zhuǎn)化是指將目的基因?qū)�入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．常用抗原-抗體雜交法檢測最終翻譯是否成功．
（4）一定時間內(nèi)間隔口服該疫苗3次，屬于二次免疫反應，體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多，導致獲得的免疫預防作用更強，持續(xù)時間更久．效果更好．
故答案為：
（1）脫氧核苷酸序列    PCR技術
（2）構建基因表達載體    DNA連接酶
（3）轉(zhuǎn)化   RNA聚合酶   抗原-抗體雜交
（4）記憶

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握獲取目的基因的幾種方法，能根據(jù)題干要求準確判斷各選項，屬于考綱識記層次的考查．